6 курс / Судебная медицина / Судебно_медицинская_диагностика_пола_по_половым_различиям_в_клетках

очень интенсиЁно окрашиваться и поперечные сгущения хроматина, выглядевшие едва заметными при окраске по Фельгену. Все это делало невозможным выявление поло­ вого хроматина в подобных случаях при окраске гематок­ силин-эозином. Поэтому мы полагаем, что оба этих мето­ да должны применяться одновременно для того, чтобы в каждом случае мог быть выбран наиболее подходящий. Нельзя поэтому согласиться с мнением Dietz (1963), ре­ комендовавшего при исследовании гнилостно измененных частей трупа для выявления полового хроматина в судеб­ но-медицинских целях только окраску по методу Фельгена.

Все сказанное свидетельствует о том, что в случаях пребывания тканей на воздухе при комнатной температу­ ре определение пола по ядрам клеток эпидермиса и соб­ ственно кожи возможно обычно в течение 5—6 дней, по ядрам поперечнополосатых мышечных волокон — в тече­ ние большего срока: 10—12, иногда даже 14 дней. Основ­ ным критерием возможности или невозможности опреде­ ления пола является состояние ядер. При сохранности большинства ядер достоверное определение пола возмож­ но во всех случаях, при сохранности же сравнительно небольшого количества ядер достоверное определение пола возможно лишь при обнаружении большого процен­ та ядер с половым хроматином, т. е. при исследовании тканей женщины. В противоположном случае от опреде­ ления пола следует отказаться.

Изменения ядер клеток и полового хроматина в тка­ нях, находившихся в воде. Изменения ядер клеток эпидер­ миса и поперечнополосатых мышечных волокон в тка­ нях, находившихся в воде, протекали неодинаково. Од­ ним из характерных изменений эпидермиса явилось его постепенное истончение за счет исчезновения клеток по­ верхностных слоев. Такое уменьшение толщины эпидер­ миса отмечалось постоянно, нередко уже через несколько суток пребывания кожи в воде.

Довсльно быстро появлялись и значительные измене­ ния в ядрах клеток эпидермиса, начинавшиеся с появле­ ния в них красноватого фона (при окраске по Фельгену), интенсивность которого постепенно нарастала. Затем структуры ядер делались нечеткими, как бы смазанными, ядра начинали выглядеть совершенно однородными. В дальнейшем интенсивность окраски таких ядер увели-

103

чивалась, размеры их уменьшались и образовывались ти­ пичные резко пикнотичные ядра. Так как развитие этих изменений происходило не строго одновременно, то обыч­ но в одном и том же препарате можно было видеть ядра со всеми описанными выше изменениями.

Нередко подвергавшиеся аутолизу ядра не изменяли своей формы, все время оставаясь круглыми или оваль­ ными (рис. 18, 2). Однако иногда пикнотичные ядра вытя­ гивались, приобретая веретенообразную форму и распо­ лагаясь параллельно поверхности эпидермиса.

Вместе с тем во многих ядрах наряду с описанными наблюдались изменения другого типа. Хроматин в них на­ чинал сгущаться у одного из краев ядра, причем одно­ временно в ядре появлялась одна или несколько мелких вакуолей. Затем у одного из краев ядра появлялась по­ степенно увеличивавшаяся полость, как бы оттеснявшая хроматин. По мере роста этой полости хроматин приобре-

104

тал форму серпа или полулуния, причем в этой массе хроматина нередко можно было заметить ядрышко или круглую полость на месте ядрышка. Подобное явление не является чем-то необычным, так как, как отмечает Walcher (1937), даже на поздних стадиях гниения долго могут быть видны ядрышки или их очертания. Такое по­ лулунное или серповидное скопление хроматина постепен­ но окрашивалось все более интенсивно, приобретая в кон­ це концов характер резко пикнотичной массы (рис. 18). Подобную серповидную форму приобретал хроматин внутри ядра, а не само ядро, так как в таких ядрах не­ редко можно было достаточно четко видеть оболочку яд­ ра, сохранявшую обычную круглую или овальную форму.

Следует отметить, что оба описанных типа изменений ядер клеток эпидермиса наблюдались одновременно, хо­ тя нередко можно было отметить преобладание одного из них.

В дальнейшем ядра подвергались кариорексису, кариолизу, число ядер уменьшалось, при этом эпидермис, обычно уже значительно истонченный, как бы запустевал, и при окраске гематоксилин-эозином в нем можно было видеть многочисленные пустоты, оставшиеся на месте ис­ чезнувших клеток.

Скорость развития всех этих аутолитическйх процес­ сов была неодинаковой в зависимости прежде всего от температуры воды. В частности, при температуре воды от + 22 до +23° уже через сутки ядра клеток эпидермиса выглядели резко пикнотичными, округлой формы или с серповидными сгущениями хроматина. Менее интенсив­ но окрашенные ядра выглядели или резко смазанными или однородными. Подобные изменения ядер клеток эпи­ дермиса делали невозможным использование их для оп­ ределения пола. В ядрах клеток собственно кожи также довольно быстро появлялся пикноз, однако здесь измене­ ния развивались медленнее, так что даже через 3 суток можно было найти большое количество неизмененных ядер.

Такие же изменения наблюдались и в случаях пребыва­ ния кожи в воде при температуре от +12 до +15°, одна­ ко при этом в течение 3—4 суток, а в отдельных случаях и через 5 суток можно было найти достаточно большое количество хорошо сохранившихся ядер. Отдельные хоро­ шо сохранившиеся ядра можно было обнаружить и че-

105

рез 8 суток, однако количество таких ядер было невелико. Половой хроматин достаточно надежно можно было оп­ ределить в этих случаях обычно лишь в течение первых суток пребывания кожи в воде, хотя в единичных хорошо сохранившихся ядрах отчетливые глыбки поло­ вого хроматина иногда можно было видеть и через 8 суток.

Изменения ядер поперечнополосатых мышечных воло­ кон были более однообразными и заключались чаще все­ го в уменьшении интенсивности окрашивания их, значи­ тельно реже—в пикнозе. Следует отметить, что. при ок­ раске гематоксилин-эозином ядра мышечных волокон значительно дольше окрашивались с достаточной интен­ сивностью. Постепенно ядра вообще переставали окра­ шиваться как по Фельгену, так и гематоксилин-эозином и не обнаруживались в препаратах.

Появление в ядрах клеток эпидермиса красноватого фоиа (при окраске по Фельгену), о котором было ска­ зано выше, представляет собой, очевидно, следствие про­ исходящей в результате аутолиза начальной стадии от­ щепления от нуклеопротеидов нуклеиновой кислоты, диффузно распределяющейся в содержимом ядра (И. В. Да­ выдовский, 1961).

Уменьшение интенсивности окрашивания ядер пред­ ставляет собой, как отмечал И. В. Давыдовский, резуль­ тат расщепления нуклеиновой кислоты на фосфорную кислоту и пуриновые основания, которые уже не воспри­ нимают ядерных окрасок. Не случайно указанные изме­ нения прежде всего выявляются при окраске по Фельге­ ну, а не при окраске гематоксилин-эозином.

Изменения ядер поперечнополосатых мышечных воло­ кон развивались с неодинаковой быстротой. Так, при тем­ пературе воды от + 22 до +23° иногда ядра не обнаружи­ вались уже через 2 суток, в то время как в других случаях хорошо сохранялись и были видны достаточно четко и через 4 суток.

При температуре воды от +12 до +15° ядра мышеч­ ных волокон обнаруживались в большом количестве без заметных изменений в большинстве случаев в течение 6—7 суток. Однако при этом постепенно наблюдалось значительное уменьшение интенсивности окрашивания их по Фельгену, в связи с чем для их выявления более удоб­ ной оказалась окраска гематоксилин-эозином.

106

Уменьшение интенсивности окрашивания ядер попе­ речнополосатых мышечных волокон происходит значи­ тельно быстрее, чем уменьшение интенсивности окраши­ вания глыбок полового хроматина. Поэтому у женщин половой хроматин в таких ядрах достаточно хорошо обна­ руживается в большинстве случаев в течение 6—7 суток, когда можно обнаружить хотя бы и бледно окрашенные, но не имеющие других изменений ядра. При этом в ядрах при окраске гематоксилин-эозином можно иногда обна­ ружить четкие, интенсивно окрашенные глыбки полового хроматина (рис. 19). Даже в более поздние сроки в не­ которых случаях удавалось отчетливо различить глыбки полового хроматина.

Описанное обстоятельство имеет важное значение, так как при исследовании мышечной ткани, находившейся в воде, исключается возможность ошибочного определе­ ния пола. Короткий срок, в течение которого обычно со­ храняются ядра мышечных волокон (6—7 суток), недоста­ точен для сколько-нибудь значительного уменьшения про­ цента ядер, содержащих половой хроматин у женщин. Частота встречаемости полового хроматина у женщин, следовательно, сохраняется на достаточно высоком уров­ не до тех пор, пока в препаратах обнаруживаются сохра­ нившиеся ядра. В то же время в ядрах мышечных воло­ кон у мужчин не происходит таких изменений, которые могли бы привести к ошибочно большому определению процента полового хроматина.

107

Изменения ядер клеток и полового хроматина при действии высокой температуры. При исследовании кле­ ток различных тканей, подвергшихся действию высокой температуры, как в экспериментах, так и в случаях из сек­ ционной практики наблюдались однотипные изменения. Кровь в сосудах тканей, подвергшихся действию высокой температуры, имела вид черно-бурой массы, состоявшей из мелких глыбок, комочков, палочек неправильной фор­ мы, различной величины. Во многих случаях в тканях главным образом таких органов, как почка и печень, мо­ жно было видеть многочисленные мелкие полости, рас­ полагавшиеся группами.

Ядра клеток нередко очень хорошо сохранялись даже в тканях, выглядевших макроскопически резко изменен­ ными при действии высокой температуры. При этом речь не может идти о каких-либо возможных методических погрешностях в выполнении наших экспериментов, так как то же самое наблюдалось и в случаях из практики.

В подавляющем большинстве наших экспериментов при исследовании обугленных тканей, выглядевших сухи­ ми и серыми, на разрезе, также обнаруживались неизмен­ ные ядра клеток с четко различимыми глыбками полового хроматина (рис. 20). Вместе с тем нередко можно было видеть и различные изменения ядер, заключавшиеся в следующем. При сравнительно небольшой интенсивно­ сти действия высокой температуры можно было видеть деформированные ядра клеток с несколько утолщенной оболочкой, причем некоторые из них имели как бы сма­ занный вид. Ядерные структуры в таких ядрах различа­ лись нечетко, имели расплывчатые контуры, в связи с чем выявление в них глыбок полового хроматина делалось невозможным. Некоторые ядра клеток при этом как бы «мерцали» подобно ядрам в плохо обезвоженных препа­ ратах. Описанные изменения нередко встречались глав­ ным образом в каком-либо одном участке препарата, соответственно месту наибольшего действия высокой тем­ пературы, в то время как на остальном протяжении его какие-либо изменения ядер клеток отсутствовали. "В дру­ гих случаях такие измененные ядра клеток располагались равномерно среди остальных неизмененных ядер. Иногда ядра отдельных клеток, обычно окруженных неизменен­ ными клетками, увеличивались в объеме, при этом в цент­ ре их появлялась крупная полость или вакуоль, что де-

108

лало невозможным обнаружение в Них полового хрома­ тина.

При более интенсивном воздействии высокой темпера­ туры ядра клеток нередко приобретали красноватый (при окраске по Фельгену) или синеватый (при окраске гема­ токсилин-эозином) фон, причем иногда дело доходило до образования резко пикнотичных, бесструктурных, ин­ тенсивно окрашенных ядер, имевших обычно круглую форму.

С другой стороны, главным образом в мышечной тка­ ни нередко можно было видеть резкое уменьшение ин­ тенсивности окрашивания ядер, особенно в случаях наи­ более сильного воздействия высокой температуры. Сле­ дует, однако, отметить, что зависимость между характе­ ром изменений ядер клеток и степенью разрушения тка­ ней, определяемая по их внешнему виду, довольно отно­ сительна, так как иногда даже при значительном разру­ шении трупа под действием высокой температуры обна­ руживались хорошо сохранившиеся ядра клеток, в то время как в других случаях при меньших изменениях трупа или его частей в ядрах клеток обнаруживались весьма значительные изменения.

Вместе с тем во многих случаях ядра клеток различ­ ных тканей довольно хорошо сохраняются при действии на них высокой температуры. Как показывают наши дан­ ные, при этом особенно хорошо сохраняются ядра попе­ речнополосатых мышечных волокон, которые мы рас­ цениваем как наиболее благоприятный объект для ис­ следования в подобных случаях.

С экспертной точки зрения немаловажное значение имеет то обстоятельство, что в ядрах клеток под воздей­ ствием высокой температуры не появляются такие обра­ зования, которые можно было бы ошибочно принять за половой хроматин. С другой стороны, в ядрах клеток не наблюдается исчезновения глыбок полового хроматина, которое происходило бы без изменений самих ядер. По­ этому при исследовании .тканей, подвергшихся действию высокой температуры, важным критерием возможности определения пола служит состояние ядер: при наличии неизмененных ядер определение пола может быть произ­ ведено с большей достоверностью, при наличии измене­ ний большинства ядер от определения пола следует от­ казаться.

ПО

Результаты наших исследований свидетельствуют о возможности применения метода определения пола по ядрам клеток в судебно-медицинской практике при ис­ следовании посмертно измененных тканей. Однако такое исследование может быть успешным лишь при соб­ людении некоторых правил.

Прежде всего необходимо иметь сведения об усло­ виях, в которых находились части трупа, подвергаемые исследованию, так как лишь при обнаружении в иссле­ дуемой ткани полового хроматина в высоком проценте клеток принадлежность этой ткани женщине не вызывает сомнений. Если же половой хроматин не обнаруживается или обнаруживается лишь в небольшом числе клеток, то правильное определение пола без знания условий, в ко­ торых находилась исследуемая ткань, невозможно.

Для правильной оценки результатов исследования по­ лового хроматина необходимо учитывать, находилась ли ткань на воздухе при действии низкой температуры или в других условиях (на воздухе при комнатной темпера­ туре, в воде или подверглась действию высокой темпе­ ратуры), так как в первом и втором случаях приходится использовать различные критерии при подведении итогов проведенного исследования. Указанное различие заклю­ чается в том, что при исследовании тканей, находивших­ ся на холоде, чрезвычайно важным критерием, без кото­ рого правильное определение пола нередко невозможно, является длительность пребывания ткани или части тру­ па на холоде. Только при учете этого фактора возможно правильное определение пола.

Длительность же пребывания тканей на воздухе при комнатной температуре или в воде, а также интенсив­ ность действия внешних факторов, например высокой температуры, имеют значительно меньшее значение для оценки правильности результатов проведенного иссле­ дования по сравнению с состоянием ядер клеток, сте­ пенью их сохранности. В случаях, когда при исследова­ нии обнаруживаются хорошо сохранившиеся ядра кле­ ток, наличие или, наоборот, отсутствие полового хрома­ тина имеет решающее значение для определения пола. Обнаружение значительных изменений ядер клеток за­ ставляет отказаться от попытки определения пола по ядрам клеток. Лишь при обнаружении .полового хрома­ тина в ядрах небольшого числа клеток в случаях пребы-

Ш