5 курс / Пульмонология и фтизиатрия / Регенерация_скелетных_мышц_и_реакция_иммунной_системы_млекопитающих

Рис. 12. Мышечная ткань в дистальной половине перерезанной икроножной мыш-

цы после воздействия излучения He-Ne лазера на поздних сроках регенерации: уве-

личение прослоек соединительной и жировой тканей между пучками мышечных

волокон. Срок регенерации 30 сут. Ув. Ч 80.

соединительной ткани, а также выявлялись скопления жировых, тучных клеток и макрофагов (рис. 13). Отмечались дилатация, гиперемия крупных кровеносных сосудов, в просветах которых были видны лейкоциты. К 60-м сут на фоне описанного выше состояния мышечных регенератов происходило увеличение количества жировой ткани не только в области травмы, но и между пучками мышечных волокон, расположенных далеко от нее.

Анализ морфометрических данных мышечных регенератов в условиях воздействия лазерного излучения на ранних сроках восстановительного процесса в мышце представлен на рисунке 14. В травмированной мышце под воздействием лучей He-Ne лазера через 7 сут в 2 раза ускорялась резорбция фибрина и продуктов распада тканей. Через 14 сут (к моменту завершения лазеротерапии) достоверно снижалось количество мышечной ткани. Через неделю после завершения лазерных экспозиций (на 21-е сут) продолжала снижаться масса регенератов (0.37±0.01% в контроле и 0.33±0.01% в опыте, p<0.02). В последующие сроки восстановления прослеживалась тенденция к увеличению массы травмированных мышц (на 7 и 13%). Количество мышечной ткани не отличалось достоверно от контроля. Однако соотношение

30

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 13. Область травмы в икроножной мышце в условиях воздействия He-Ne лазе-

ра на поздних сроках регенерации мышцы: тяжи коллагеновых волокон, скопления

тучных клеток и макрофагов около сосудов (широкие стрелки), участки жировой

ткани, дилатация и гиперемия кровеносных сосудов(тонкие стрелки). Срок регене-

рации 30 сут. Ув. Ч 80.

тканей в регенератах у подопытных крыс складывалось в пользу мышечной ткани. Например, в 30-суточных регенератах количество мышечной ткани по площади, занимаемой на гистологических срезах мышцы, в опыте было больше, чем соединительной в 6.4 раза (86.5±1.2% и 13.5±1.2%, соответственно), в то время как в регенератах контрольных животных в 4.2 раза (81.0±3.0% и 19.0±3.0%, соответственно). В 60-суточных регенератах повышенное количество мышечной ткани сохранялось.

В условиях воздействия излучения He-Ne лазера в такой же дозе и режиме экспозиции, но только в период с 15-х по 30-е сут после травмы мышцы (рис. 15), было отмечено постепенное увеличение массы мышечных регенератов по сравнению с контролем. Через 60-сут различия были достоверны (0.38±0.01 в опыте и 0.31±0.02% в контроле, p<0.01). Наблюдалось также усиление склеротизации мышечной ткани: разрастание соединительной ткани не только в период лазеротерапии травмированных мышц, т.е. с 15-х по 30-е сут, но и после окончания лазерного воздействия. Содержание соединительной ткани в регенератах на 21-е, 30-е и 60-е сут увеличивалось на 3, 10 и

31

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 14. Морфометрический анализ регенератов икроножных мышц при воздей-

ствии He-Ne лазера на оперированные конечности крысы с 1-х по 15-е сут после

травмы.

Примечание. Ось абсцисс – сроки регенерации мышц, сут. Ось ординат – процент

средних значений исследуемых показателей к соответствующим показателям в

контроле (без лазерного воздействия). Достоверные различия по сравнению с

контрольными регенератами.

Рис. 15. Морфометрический анализ регенератов икроножных мышц при воздействии

He-Ne лазера на оперированные конечности крысы с 15-х по 30-е сут после травмы.

Примечание. Ось абсцисс – сроки регенерации мышц, сут. Ось ординат – процент

среднихзначенийисследуемыхпоказателейксоответствующимпоказателямвкон-

троле (без лазерного воздействия). Достоверные различия по сравнению с конт-

рольными регенератами. Величина столбиков через 7 и 14 сут, равная 100%, озна-

чает, что в этот период данные в опыте аналогичны данным в контроле.

32

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

16%, соответственно, по сравнению с мышечными регенератами без лазерного воздействия (контроль). Увеличение соединительной ткани в этом слу- чае было достоверным по сравнению с серией опытов, где регенераты подвергались лазерному воздействию сразу же после мышечной травмы. Площадь, занимаемая соединительной тканью в 21-, 30- и 60-суточных регенератах при воздействии лазера на ранних сроках восстановления мышц составляла 18.3±1.2, 13.5±1.2 и 15.0±1.3%, соответственно, при лазеротерапии на поздних сроках 25.6±2.0, 20.9±2.5 и 20.1±1.1%, соответственно. Различия были статистически достоверны при p<0.01, p<0.02 и р< 0.01 .

ТИМУС. Воздействие лазерных лучей в течение первых 15 сут после травмы обеих икроножных мышц ускоряло реактивные изменения в тимусе по сравнению с контролем (без лазеротерапии). В этот период отмечалось уменьшение величины тимуса, более быстрое развитие аплазии органа. Уже через 7 сут во многих дольках было отмечено сужение коркового слоя за счет расширения мозгового, нарушение четких границ между слоями, инверсия слоев, агломерация тимоцитов (рис. 16). Ядра лимфоидных клеток подвергались пикнотическим изменениям. Между дольками и в мозговом веществе

Рис. 16. Тимус крысы через 7 сут после травмы обеих икроножных мышц и воздей-

ствия He-Ne лазера на мышцы в ранние сроки регенерации: сужение коркового слоя

за счет расширения мозгового, нарушение четких границ между слоями, инверсия

слоев, агломерация тимоцитов. Ув. Ч 25.

33

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 17. Корковый слой тимуса крысы через 60 сут после травмы обеих икронож-

ных мышц и воздействия He-Ne лазера на мышцы в ранние сроки регенерации:

аплазия органа, видны крупные ядра клеток ретикуло-эпителиальной стромы, ка-

риопикноз в тимоците (стрелка). Ув. Ч 900.

выявлены расширенные кровеносные сосуды. Дальнейшее восстановление

тимуса происходило медленно. На 21-е и 30-е сут наблюдались в небольшом

количестве дольки с некоторыми признаками восстановления структуры (уве-

личение коркового слоя, большая пролиферативная активность тимоцитов).

Однако через 60 сут структурные изменения в тимусе и аплазия органа все

еще сохранялись (рис. 17).

При воздействии лазерного излучения в более поздние сроки восстано-

вительного процесса в мышцах реактивные изменения в тимусе были выра-

жены в меньшей степени. В период лазеротерапии травмированных мышц

(с 15-х по 30-е сут) в септах и мозговом слое тимуса появлялось большое

количество гиперемированных кровеносных сосудов. Среди долек с нормаль-

ным строением встречались в небольшом количестве дольки с интенсивной

агломерацией клеток тимуса, ярко выраженной аплазией, увеличенным моз-

говым слоем, нарушением четкости границ и инверсией слоев. К концу на-

блюдаемого срока (60 сут) в целом структура тимуса была более восстанов-

ленной, чем в этот же период в серии с лазеротерапией икроножных мышц

на ранних сроках регенерации.

Морфометрические данные тимуса, полученные при воздействии излуче-

ния He-Ne лазера на ранних сроках восстановительного процесса в мышцах,

представлены на рисунке 18. Через 7 сут отмечалось статистически достовер-

34

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

ное уменьшение величины коркового слоя (0.76±0.02% в контроле и 0.67±0.02%

âопыте, p<0.02) и на 14-е сут снижение массы тимуса (0.14±0.01% в контроле и 0.08±0.02% в опыте, p<0.05). Через неделю после завершения лазеротерапии (21 сут) достоверно снижался митотический индекс тимоцитов (18.3±0.4‰

âконтроле и 12.8±2.2‰ в опыте, р<0.05). На 30-е сут масса тимуса была максимальной и достоверно отличалась от соответствующего срока регенерации

âконтроле. В этот же период максимальных размеров достигал корковый слой. На 28% повышалась средняя величина митотического индекса. Однако к концу наблюдения (60-е сут), за исключением митотического индекса тимоцитов, выявлялась тенденция к снижению этих показателей, что, возможно, отражает замедление восстановления функционального состояния тимуса в условиях воздействия He-Ne лазера на ранних сроках регенерации. Различия в величи- не митотического индекса тимоцитов были недостоверны (10.0±1.2‰ в контроле и 15.1±4.0‰ в опыте).

При лазеротерапии обеих икроножных мышц на более поздних сроках регенерации реактивные изменения в тимусе в период лазерного воздействия (с 15-х по 30-е сут) практически не отличались от контроля (рис. 19). Лишь через месяц после завершения лазеротерапии (на 60-е сут) существенно усиливалась пролиферативная активность тимоцитов (10.0±1.2‰ в контроле и 31.4±3.1‰ в опыте, p<0.01), что, по-видимому, способствовало более быстрому восстановлению структуры тимуса (через 60 сут величина коркового слоя не отличалась от соответствующего показателя в тимусе контрольных крыс). Следует отметить также различия в реакции тимуса в зависимости от периода воздействия лазера на регенерирующие мышцы. При воздействии лазерного излучения на ранних сроках регенерации мышц все изученные показатели (масса тимуса, величина коркового слоя и митотический индекс тимоцитов) в этот период (на 7-е и 14-е сут) были достоверно ниже или имели тенденцию к снижению по сравнению с контролем (рис. 18), тогда как при воздействии лазерных лучей в более поздние сроки восстановления мышц изменения в тимусе в этот период (на 21-е и 30-е сут) были выражены в меньшей степени (рис. 19). Незначительно снижалась масса тимуса, сохранялся более широкий корковый слой и сравнительно высокая митотическая активность тимоцитов.

Эффект излучения He-Ne лазера в условиях трехкратного снижения

дозы на ранних сроках регенерации мышц

Проведены эксперименты, в которых доза лазерного воздействия была уменьшена за счет укорочения длительности каждой экспозиции. Было дано 10 процедур по 1 мин в течение первых 15 сут после травмы мышц (ежедневно за исключением выходных). Плотность мощности на облученной поверхности голени была равна 2.5–3.0 мВт/см2 .

35

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 18. Показатели активности тимуса при воздействии He-Ne лазера на опериро-

ванные конечности крысы с 1-х по 15-е сут после травмы икроножных мышц.

Примечание. Ось абсцисс – сроки регенерации мышц, сут. Ось ординат – процент

средних значений исследуемых показателей к соответствующим показателям в

контроле (без лазерного воздействия). Достоверные различия по сравнению с

контролем.

Рис. 19. Показатели активности тимуса при воздействии He-Ne лазера на опериро-

ванные конечности крысы с 15-х по 30-е сут после травмы икроножных мышц.

Примечание. Ось абсцисс – сроки регенерации мышц, сут. Ось ординат – процент

средних значений исследуемых показателей к соответствующим показателям в

контроле (без лазерного воздействия). Достоверные различия по сравнению с

контролем. Величина столбиков через 7 и 14 сут, равная 100% , означает, что в

этот период данные в опыте аналогичны данным в контроле.

36

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Суммарная доза на курс лазеротерапии составила на одну конечность 1.5–

1.8Äæ/ñì2 , в целом на каждое животное 3.0–3.6 Дж/см2.

МЫШЦЫ.Гистологическая структура регенератов. Трехкратное сни-

жение дозы лазерного воздействия на ранних сроках регенерации мышц нарушало и замедляло реакцию воспаления и рост грануляционной ткани. Че- рез 7 сут в большинстве регенератов в центре дефекта лежало еще довольно большое количество фибрина и продуктов распада тканей (рис. 20). Отмеча- лась слабая лейкоцитарная инфильтрация. Интерстициальное пространство между концами травмированных мышечных волокон увеличивалось, что может свидетельствовать об интенсивном экссудативном отеке тканей. В расширенных септах проксимальной культи основное вещество соединительной ткани было гомогенным. Замедлялась регенерация мышечной ткани. В некоторых мышечных волокнах появлялись вакуоли, нарушалось упорядо- ченное расположение миофибрилл (рис. 21). Там, где пространство между обеими культями было заполнено более сформированной соединительной тканью, можно было видеть некоторый рост мышечных элементов. На концах травмированных мышечных волокон скапливалось большое количество округлых мышечных ядер, формировались миотубы, но их росту препят-

Рис. 20. Область травмы в перерезанной мышце в условиях трехкратного снижения

дозы излучения He-Ne лазера на ранних сроках регенерации: фибрин, продукты рас-

пада тканей, подавление формирования грануляционной ткани и регенерации мы-

шечных волокон. Срок регенерации 7 сут. Ув. Ч 25.

37

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 21. Край проксимальной культи перерезанной икроножной мышцы в условиях

трехкратного снижения дозы излучения He-Ne лазера на ранних сроках регенера-

ции: образование вакуолей, разрушение миофибрилл в волокне. Срок регенерации

7 ñóò. Óâ. × 400.

ствовали фибрин и нарушение образования соединительной ткани (рис. 22). В 14-суточных регенератах сохранялись экссудативный отек тканей, фибрин и продукты тканевого распада. Формирование грануляционной ткани в области дефекта происходило медленно и неравномерно. Отмечалось довольно широкое пространство, заполненное рыхлой соединительной тканью с немногочисленными многоотростчатыми фибробластами, макрофагами, лейкоцитами, врастающими капиллярами и единичными хаотично расположенными волокнистыми структурами между ними. Местами около культей формировался неширокий слой грануляционной ткани, в которой были видны капилляры, митозы в фибробластах и эндотелиоцитах, а также коллагеновые волокна. В мышечной ткани дистальной культи увеличивались соединительнотканные прослойки.

Об отсутствии стимулирующего эффекта излучения He-Ne лазера в условиях трехкратного снижения дозы лазерного воздействия на ранних сроках регенерации мышц говорят и результаты морфометрического анализа, представленные на рисунке 23. Значительный подъем массы мышечных регенератов на 7-е сут и его снижение до уровня контроля на 14-е сут после травмы

38

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/

Рис. 22. Край проксимальной культи перерезанной икроножной мышцы в условиях

трехкратного снижении дозы излучения He-Ne лазера на ранних сроках регенера-

ции: скопления ядер на концах мышечных волокон, подавление роста грануляцион-

ной ткани, формирование узкого слоя коллагеновых волокон. Срок регенерации 7

ñóò. Óâ. × 200.

скорее всего обусловлен развитием сильного экссудативного отека в тканях мышцы сразу же после ее травмы, что подтверждается и гистологическими данными. Наблюдались высокий уровень фибрина в 7-суточных регенератах (2.5±0.6% в контроле и 4.7±1.0% в опыте, p<0.1) и сохранение его на 14- е сут после мышечной травмы (1.0±0.3%). Данные свидетельствуют о снижении резорбирующей активности макрофагов, торможении и нарушении реакции воспаления в мышечной ране по сравнению с серией опытов, где доза лазерного воздействия была в 3 раза выше (сравнить с рис. 14). В период лазеротерапии в регенератах отмечалось меньшее количество мышечной ткани по сравнению с контролем. Через 14 сут различия достоверны (85.5±1.9% в контроле и 79.7±1.2% в опыте, p<0.02).

ТИМУС. В ответ на травму обеих икроножных мышц и их лазеротерапию в условиях трехкратного снижения дозы излучения He-Ne лазера в те- чение первых 15 сут после операции, в целом, структура тимуса сохранялась. Отмечалась умеренная аплазия органа. Масса тимуса и величина коркового слоя в дольках достоверно не изменялись по сравнению с контрольны-

39

Книга в списке рекомендаций к прочтению и покупке сайта https://meduniver.com/