5 курс / Пульмонология и фтизиатрия / Лабораторная_служба_в_программах_борьбы_с_туберкулезом_ВОЗ_бактериоскопия

ОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ МИКОБАКТЕРИЙ

Проводите дополнительное окрашивание в течение 60 секунд

Тщательно промойте стекло водой. Удалите остатки влаги. Оставьте препарат высыхать на воздухе.

Не промокайте

7 . 2 Окрашивание флуорохромами

При люминесцентной микроскопии в качестве источника света используют кварцгалогеновую или ртутную лампу. Преимущество люминесцентного метода микроскопии заключается в том, что используя объектив с меньшим увеличением можно быстрее просмотреть большую площадь препарата. Недостатком является то, что при использовании объектива с меньшим увеличением, выше вероятность ошибочно принять артефакт за КУМ. Поэтому мы настоятельно рекомендуем, чтобы при выявлении «подозрительных микроорганизмов» обязательно было проведено исследование под большим увеличением, и чтобы при позитивном результате бактериоскопии препаратов, окрашенных флуорохромами, была проведена подтверждающая микроскопия препаратов, окрашенных по Цилю-Нильсену.

Для бактериоскопического исследования на туберкулез не следует приобретать очень дорогие современные люминесцентные микроскопы. Вполне достаточно иметь микроскоп со следующими техническими характеристиками:

•Достаточно галогеновых ламп. Обычно они уже встроены в микроскоп и имеют гораздо меньшую стоимость по сравнению с ртутными лампами, у которых, кроме того, еще и ограничен срок работы. Галогеновые лампы нагреваются практически сразу.

•Необходим достаточно мощный световой поток, поэтому значение апертуры конденсора и двух объективов должно быть достаточно большим. Необходимо иметь 3 объектива: например, с увеличениями в 10 и 25 раз для предварительного просмотра препаратов и с увеличением в 45 раз для уточнения морфологии выявленных элементов.

30

ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ

31

ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ

Поместите маркированные предметные стекла на подставку («салазки») группами (максимально по 12 шт.) так, чтобы они не касались друг от друга

Налейте на каждое стекло достаточное количество раствора аурамина О и оставьте на 15 минут; проследите, чтобы раствор краски оставался на препаратах.

Не нагревайте препараты и не используйте полоски фильтровальной бумаги

Аурамин О

Промойте дистиллированной водой и подсушите. Водопроводная вода содержит хлор, который может повлиять на интенсивность флуоресценции

33

ОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ МИКОБАКТЕРИЙ

Нанесите на препарат обесцвечивающий 3%-ный кислотно-спиртовой раствор на 2 минуты

Промойте дистиллированной водой и подсушите

Нанесите на мазок раствор перманганата калия или акридинового оранжевого и оставьте для докрашивания на 2 минуты. При использовании перманганата калия

точность экспозиции имеет решающее значение, так как при передержке интенсивность флуоресценции КУМ может уменьшаться

Промойте дистиллированной водой и слейте воду

Оставьте препараты сохнуть на воздухе. Не вытирайте. Исследуйте сразу же после окрашивания

34

ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ

35

ЛАБОРАТОРНАЯ СЛУЖБА В ПРОГРАММАХ БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЕЗОМ

39