2 курс / Нормальная физиология / Fiziologia_krovi
.pdfкоторые агглютинируют резус-положительные эритроциты плода, поступающие в ее организм и иммунизации не наступает.
УЧЕБНЫЕ ВОПРОСЫ
1.Группы крови (система АВ0, резус-принадлежность, другие системы). Правила переливания крови. Кровезаменяющие растворы.
2.Наследование групп крови.
3.Тромбоциты, их строение, количество, функции.
4.Процесс свертывания крови (А.А. Шмидт) и его значение.
5.Современные представления об основных факторах, участвующих в свертывании крови (тканевые, плазменные, тромбоцитарные, эритроцитарные, лейкоцитарные).
6.Фазы свертывания крови.
7.Фибринолиз, этапы фибринолиза.
8.Свертывающая, противосвертывающая и фибринолитическая системы крови как главные аппараты функциональной системы поддержания ее жидкого состояния.
9.Факторы, ускоряющие и замедляющие свертывание крови. Регуляция гемостаза.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА
Темы практических работ:
1.Определение времени свертывания крови.
2.Определение групп крови системы АВ0.
3.Определение резус-принадлежности.
4.Определение индивидуальной совместимости крови по системе АВ0.
Работа 1. Определение времени свертывания крови.
Метод свертывание крови in vitro является одним из широко применяемых в клинической практике. Однако позволяет выявить лишь грубый дефицит факторов свертывания (фибриногена, антигемофильных глобулинов, протромбина). Время свертывания крови зависит от используемого способа определения, поэтому в результате всегда необходимо указывать название метода.
По Сухареву. (В норме начало свертывания 0,5-2 минуты, конец -3-5
минут.)
Оснащение: сухой капилляр Панченкова, секундомер.
Ход работы: уколите палец. Первую каплю удалите. В капилляр Панченкова наберите 25 мм крови. Включите секундомер. Путем наклона капилляра на 45о переведите взятую кровь на его середину. Затем каждые 30 секунд наклоняйте капилляр на 45о сначала в одну сторону, затем возвращайте капилляр в горизонтальное положение и через 30 секунд вновь
41
наклоняйте его, но уже в другую сторону. Отметьте момент замедления движения крови или появления на стенке капилляра микросгустков. Окончание процесса свертывания регистрируйте в момент полного прекращения движения крови.
По Альтгаузену. (В норме время свертывания 5-6 минут.) Оснащение: часовое стекло, секундомер, скарификатор.
Ход работы: чистое и сухое часовое стекло согрейте на ладони до температуры тела. Нанесите на стекло 2-3 капли капиллярной крови. Включите секундомер. Через каждые 30 секунд проводите через кровь скарификатором до тех пор, пока не потянется первая нить фибрина. Зафиксируйте время.
Оформление результатов работы: полученные результаты определения времени свертывания крови по обеим методикам занесите в тетрадь протоколов опытов, оцените их и сделайте вывод, сравнив с нормой.
Работа 2. Определение групп крови системы АВ0.
Для определения групп крови используют стандартные сыворотки, содержащие определенный титр агглютининов или цоликлоны.
Использование стандартных сывороток.
Оснащение: предметные стекла, вата, стандартные сыворотки крови групп 0(I), А(II) и В(III).
Ход работы: предметное стекло поместите на белую бумагу и нанесите (не смешивая) по капле стандартной сыворотки 0(I), А(II) и В(III) групп. Возьмите другое предметное стекло, и первым его углом перенесите небольшое количество крови, полученной из пальца, в каплю сыворотки I группы, затем вторым углом стекла перенесите такое же количество крови в сыворотку II группы, третьим углом – в сыворотку III группы крови. При этом, каждый раз перемешивайте тщательно кровь в капле сыворотки, пока смесь не примет равномерно розовый цвет. Акция агглютинации наступает через 1-5 минут.
При отсутствии агглютинации, капля остается равномерно окрашенной. При агглютинации капля состоит из комочков красного цвета, разделенных прозрачной смесью плазмы и стандартной сыворотки.
Для исключения «холодовой агглютинации» к капле сыворотки с кровью прилейте каплю физиологического раствора комнатной температуры.
Группу крови установите в зависимости от агглютинации (таб.3):
1.При отсутствии агглютинации со всеми тремя сыворотками, кровь принадлежит к 0(I) группе.
2.При агглютинации с сыворатками I и III групп, кровь принадлежит ко А(II) группе.
3.При агглютинации с сыворатками I и II групп, кровь принадлежит к В(III) группе.
4.При агглютинации с сыворатками I, II и III групп, кровь принадлежит к АВ((IV) группе.
42
Таблица 3. Интерпретация результатов определения группы крови системы АВ0
с использованием стандартных сывороток.
|
|
|
Исследуемая |
Результат реакции с сывороткой группы |
кровь |
||
|
|
|
принадлежит к |
0(αβ) |
А(β) |
В(α) |
группе |
|
|||
_ |
_ |
_ |
0(I) |
|
|
|
|
+ |
_ |
+ |
А(II) |
|
|
|
|
+ |
+ |
_ |
В(III) |
|
|
|
|
+ |
+ |
+ |
АВ(IV) |
|
|
|
Примечание: знаком «+» обозначено наличие агглютинации, знаком «-» - отсутствие агглютинации.
Использование цоликлонов.
Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения группы крови человека системы АВ0 вместо стандартных гемагглютинирующих сывороток.
Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М.
Цоликлоны готовят из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом. Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти-А и анти-В антител. В отличии от сывороток, в цоликлонах наблюдается высокий титр антител.
Время наступления реакции агглютинации и ее выраженность у цоликлонов выше, чем у гемагглютинирующих АВ0-сывороток.
Оснащение: цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ; пластина или планшет, пипетки, стеклянные палочки.
Ход работы: нанесите на планшет или пластину индивидуальными пипетками цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле (0,01 – 0,03 мл) исследуемой крови, смешайте кровь с реагентом. Наблюдайте за ходом реакции при периодическом покачивании пластины в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-6 секунд, однако наблюдение следует вести 3 минуты.
Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации
43
(склеивании) эритроцитов. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с цоликлонами представлена в таблице 4.
Таблица 4. Интерпретация результатов определения группы крови системы АВ0 с
использованием цоликлонов
Результат реакции с цоликлоном |
|
||
анти-А |
анти-В |
анти-АВ |
Группа крови |
- |
- |
- |
0 (I) |
+ |
- |
+ |
А(II) |
- |
+ |
+ |
В(III) |
+ |
+ |
+ |
АВ(IV) |
Примечание: знаком «+» обозначено наличие агглютинации, знаком «-» - отсутствие агглютинации.
Оформление результатов работы: опишите полученные результаты в тетради протоколов опытов. Рекомендуется сделать цветной рисунок, демонстрирующий агглютинацию эритроцитов в разных каплях сыворотки или цоликлона. Определите групповую принадлежность исследуемой крови и сделайте вывод, отразив значения определения группы крови системы АВ0 для клиники.
Работа 3. Определение резус-принадлежности.
Для определения резус-фактора в настоящее время используют стандартную сыворотку, содержащую определенный титр агглютининов или цоликлон анти-D.
Использование стандартных сывороток.
Оснащение: стандартная сыворотка анти-резус двух разных серий, пластина или планшет, пипетка, стеклянные палочки, изотонический раствор хлорида натрия.
Ход работы: на пластину или планшет нанесите по капле антирезусной сыворотки двух разных серий. Стеклянными палочками смешайте небольшое количество крови с сывороткой в обоих рядах. Пластину периодически покачивайте в течение 3 минут, затем добавьте по одной капле изотонического раствора хлорида натрия и продолжайте наблюдение до истечения 5 минут.
Реакция может быть положительной или отрицательной (см. работу 2). Если реакция положительная, то исследуемая кровь содержит резус-фактор, и ее называют резус-положительной. Отрицательная реакция свидетельствует о том, что исследуемая кровь является резус-отрицательной.
44
Использование цоликлонов.
Оснащение: цоликлон анти-D, пластина или планшет, пипетка, стеклянная палочка.
Ход работы: на пластину или планшет нанесите большую каплю (около 0,1 мл) цоликлона анти-D, рядом поместите маленькую каплю (0,01- 0,05 мл) исследуемой крови смешайте стеклянной палочкой. Реакция агглютинации начинается через 10-15 секунд, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 секунд. (Для сокращения времени начала реакции планшет можно предварительно подогреть до 3740о С.) Результаты реакции учитывайте через 3 минуты. Планшет после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 секунд, для образования более полной крупнолепестковой агглютинации.
Оформление результатов работы: опишите полученные результаты в тетради протоколов опытов. Рекомендуется сделать цветной рисунок, демонстрирующий агглютинацию эритроцитов в каплях сыворотки или цоликлоне. Определите резус-принадлежность исследуемой крови и сделайте вывод, отразив значения определения резус-фактора для клиники.
Работа 4. Определение индивидуальной совместимости крови по системе АВ0.
Гемотратсфузия – это серьезная операция по транплантации живой ткани человека. Перед переливанием крови помимо определения групповой и резус-принадлежности крови донора и реципиента определяют еще и их индивидуальную совместимость.
Оснащение: микроцентрифуга с пробирками, предметное стекло, две глазные пипетки, стеклянная палочка, 5% раствор цитрата натрия, изотонический раствор хлорида натрия.
Ход работы: кровь реципиента в количестве 1-2 мл поместите в центрифужную пробирку, добавьте одну каплю 5% цитрата натрия и центрифугируйте 10-15 минут, для отделения плазмы от форменных элементов.
На предметное стекло поместите каплю плазмы реципиента, а рядом каплю крови донора в соотношении 10:1. Перемешайте капли стеклянной палочкой в течение 5 минут, после чего добавьте каплю изотонического раствора хлорида натрия.
Оформление результатов работы: опишите полученные результаты в тетради протоколов опытов. Сделайте вывод о совместимости или несовместимости крови донора и реципиента и возможности переливания крови.
45
VI. Примеры тестовых заданий для определения исходного уровня знаний по разделу «Физиология крови»
Тема: КРОВЬ КАК ВНУТРЕННЯЯ СРЕДА ОРГАНИЗМА. ФИЗИОЛОГИЯ ЭРИТРОЦИТОВ И ЛЕЙКОЦИТОВ.
Выберите один правильный ответ
1.СОСТАВНЫМИ ЧАСТЯМИ КРОВИ ЯВЛЯЮТСЯ
1.плазма и форменные элементы
2.тканевая жидкость и лейкоциты
3.лимфа и лимфоциты
2.ОБЪЕМНОЕ СООТНОШЕНИЕ ПЛАЗМЫ И ФОРМЕНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ СОСТАВЛЯЕТ
1.плазма-55-60%, форменные элементы - 40-45%
2.плазма- 40-45%, форменные элементы - 55-60%
3.ВЕЛИИНА ОСМОТИЧЕСКОГО ДАВЛЕНИЯ КРОВИ СОСТАВЛЯЕТ
1.6,6 атм
2.8,6 атм
3.25 - 30 мм рт. ст.
4.7,6 атм
4.РН АРТЕРИАЛЬНОЙ КРОВИ В НОРМЕ СООТВЕТСТВУЕТ
1.7,4
2.7,36
3.7,6
5.К БЕЛКАМ ПЛАЗМЫ КРОВИ ОТНОСЯТСЯ
1.альбумины, глобулины
2.тропонин, тропомиозин
3.актин, миозин
4.гемоглобин
6.СОДЕРЖАНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ В 1 ЛИТРЕ КРОВИ У МУЖЧИН
1.5,7 – 6,4х1012 /л
2.4,5 – 5,5х1012 /л
3.3,7 – 4,7х1012 /л
7.ОСНОВНАЯ ФУНКЦИЯ ЭРИТРОЦИТОВ - ЭТО
1.образование антител
2.перенос кислорода
46
3.участие в свертывании крови
4.фагоцитоз
8.СОДЕРЖАНИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ В КРОВИ ЧЕЛОВЕКА СОСТАВЛЯЕТ
1.4000-9000 х109/л
2.10000-14000 х109/л
3.2500-3500 х109/л
9.АГРАНУЛОЦИТЫ - ЭТО
1.нейтрофилы, эозинофилы, базофилы
2.лимфоциты, моноциты
10.СОДЕРЖАНИЕ НЕЙТРОФИЛОВ В НОРМЕ СОСТАВЛЯЕТ
1.юные- 8-10, п/яд- 0-1, с/яд - 45-70
2.юные- 0-1, п/яд -1-5, с/яд -45-70
3.юные- 1-5, п/яд - 10-20, с/яд - 25-30
Тема: ГЕМОГЛОБИН. СОЭ. ГЕМОЛИЗ.
Выберите один правильный ответ
1.СОДЕРЖАНИЕ ГЕМОГЛОБИНА В НОРМЕ У ВЗРОСЛОГО ЧЕЛОВЕКА СОСТАВЛЯЕТ В СРЕДНЕМ -
1.мужчины - 120 г/л, женщины - 100 г/л
2.мужчины - 130 г/л, женщины - 145 г/л
3.мужчины - 145 г/л, женщины - 130 г/л
2.РАЗЛИЧАЮТ СЛЕДУЮЩИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ РАЗНОВИДНОСТИ ГЕМОГЛОБИНА
1.примитивный, фетальный, взрослый
2.метгемоглобин, оксигемоглобин, карбоксигемоглобин
3.ОКСИГЕМОГЛОБИН - ЭТО
1.соединение гемоглобина с угарным газом
2.соединение гемоглобина с углекислым газом
3.соединение гемоглобина с кислородом
4.МЕТГЕМОГЛОБИН - ЭТО
1.соединение гемоглобина с кислородом
2.окисленный гемоглобин, образующийся при действии сильных
окислителей 3.соединение гемоглобина с угарным газом
4. соединение гемоглобина с углекислым газом
47
5.ХИМИЧЕСКИЙ ГЕМОЛИЗ ПРОИСХОДИТ
1.под влиянием веществ, разрушающих белково-липидную оболочку эритроцитов
2.при переливании несовместимой группы крови
3.при замораживании и оттаивании крови
4.при сильном встряхивании крови
6.МЕХАНИЧЕСКИЙ ГЕМОЛИЗ ПРОИСХОДИТ
1.под влиянием веществ, разрушающих белково-липидную оболочку эритроцитов
2.при переливании несовместимой группы крови
3.при замораживании и оттаивании крови
4.при сильном встряхивании крови
7.БИОЛОГИЧЕСКИЙ ГЕМОЛИЗ ПРОИСХОДИТ
1.под влиянием веществ, разрушающих белково-липидную оболочку эритроцитов
2.при переливании несовместимой группы крови
3.при замораживании и оттаивании крови
4.при сильном встряхивании крови
8.ТЕРМИЧЕСКИЙ ГЕМОЛИЗ ПРОИСХОДИТ
1.под влиянием веществ, разрушающих белково-липидную оболочку эритроцитов
2.при переливании несовместимой группы крови
3.при замораживании и оттаивании крови
4.при сильном встряхивании крови
9.ОСМОТИЧЕСКИЙ ГЕМОЛИЗ ВОЗНИКАЕТ ПРИ ПОМЕЩЕНИИ ЭРИТРОЦИТОВ В
1.изотонические растворы
2.гипертонические растворы
3.гипотонические растворы
10.В НОРМЕ ВЕЛИЧИНА СОЭ СОСТАВЛЯЕТ
1.у мужчин - 1-10 мм/час, у женщин - 2-15 мм/час
2.у мужчин - 15-20 мм/час, у женщин - 1-4 мм/час
3.у мужчин - 25-30 мм/час, у женщин - 1-10 мм/час
48
Тема: ФИЗИОЛОГИЯ ТРОМБОЦИТОВ. ГЕМОСТАЗ. ГРУППЫ КРОВИ. РЕЗУС-ФАКТОР.
Выберите один правильный ответ
1.СОДЕРЖАНИЕ ТРОМБЦИТОВ В КРОВИ ЗДОРОВОГО ЧЕЛОВЕКА СОСТАВЛЯЕТ
1.4-5 х109/л
2.20-40 х109/л
3.180-320 х109/л
2.СОДЕРЖАТСЯ В ЭРИТРОЦИТАХ
1.агглютиногены
2.агглютинины
3.СОДЕРЖАТСЯ В ПЛАЗМЕ КРОВИ
1.агглютиногены
2.агглютинины
4.СЫВОРОТКА КРОВИ - ЭТО
1.кровь без фибриногена
2.плазма без фибриногена
3.плазма без глобулина
4.кровь без глобулина
5.РЕЗУСФАКТОР СОДЕРЖИТСЯ В
1.эритроцитах
2.плазме крови
3.лейкоцитах
4.тромбоцитах
6.ПЕРВИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ ОБЕСПЕЧИВАЕТ СВЕРТЫВАНИЕ КРОВИ В
1.микроциркуляторных сосудах с низким кровяным давлением
2.крупных сосудах с высоким кровяным давлением
7.ВТОРИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ ОБЕСПЕЧИВАЕТ СВЕРТЫВАНИЕ КРОВИ В
1.микроциркуляторных сосудах с низким кровяным давлением
2.крупных сосудах с высоким кровяным давлением
8.ВЕЩЕСТО, СПОСОБСТВУЮЩЕЕ СЕРТЫВАНИЮ КРОВИ - ЭТО
1.кальций
2.гепарин
3.адреналин
4.цитрат натрия
49
9.ВЕЩЕСТО, ПРЕПЯТСТВУЮЩЕЕ СЕРТЫВАНИЮ КРОВИ - ЭТО
1.кальций
2.гепарин
3.адреналин
10.ВТОРАЯ ФАЗА КОАГУЛЯЦИОННОГО ГЕМОСТАЗА НАЗЫВАЕТСЯ
1.образование кровяной и тканевой протромбиназы
2.превращение протромбина в тромбин
3.образование фибрина
50