2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Морфология бактерий

31

Окраска по Граму используется в двух случаях:

для идентификации бактерий

для выбора правильного антибиотика, потому что в основном Грам+ более чувствительны к пенициллину G, чем Грам-

32

КИСЛОТОУСТОЙЧИВОСТЬ БАКТЕРИЙ

Клеточная стенка кислотоустойчивых бактерий

Микобактерии имеют необычную клеточную стенку, так что они не способны окрашиваться по Граму. Их называют кислотоустойчивыми, потому что их клеточная стенка не разрушается от воздействия сильных кислот.

Это возможно благодаря большому количеству липидов и миколовых кислот в клеточной стенке.

Окраска по Цилю-Нильсену

Метод окрашивания кислотоустойчивых бактерий – метод по Цилю-Нильсену.

1.На фиксированный мазок наносим фуксин на 3-5 минут Краситель поступает через открытые поры бактерий: окрашиваются и кислотоустойчивые и кислотоНЕустойчивые бактерии.

2.Воздействуем серной кислотой в течение 1-2 минут.

3.Смываем водой.

Клеточная стенка кислотоНЕустойчивых бактерий разрушилась под действием серной кислоты, красный краситель вымылся.

Клеточная стенка кислотоустойчивых бактерий сохранилась, благодаря наличию миколовых кислот и большому количеству липидов.

4.Наносим второй краситель – метиленовый синий.

Обесцвеченные кислотоНЕустойчивые бактерии окрашиваются в синий цвет. Кислотоустойчивые не меняют окраски: остаются красными.

Итог: кислотоустойчивые (микобактерии) – красные, кислотоНЕустойчивые – синие.

33

Напомню, что кислотоустойчивыми также являются споры бактерий.

34

Окраска по Ауески

Для окраски спор используют окраску по Ауески.

Она похожа на окраску по Цилю-Нильсену, но у нее есть свои особенности:

1.Сначала на НЕфиксированный мазок наносят серную или соляную кислоту на 2-3 минуты, сливают ее, промывают водой и фиксируют мазок.

Это делают для протравки, то есть для того, чтобы краситель лучше зафиксировался на окрашиваемых структурах.

2.Проводим окраску фиксированного мазка по ЦилюНильсену.

Итог: споры окрашиваются в красный цвет.

35

ФОРМА БАКТЕРИЙ

Форма бактерий может быть различной:

Некоторые бактерии – плеоморфные, могут принимать различную, неправильную форму.

Микроскопический внешний вид бактерии – это один из наиболее важных критериев ее идентификации.

Важна не только форма, но и расположение бактериальных клеток, например, кокки могут делиться

вразных плоскостях, и будут получаться различные скопления клеток:

пары (диплококки) – ограниченное деление в одной плоскости

четверки (тетракокки) – ограниченное деление в 2х плоскостях

цепи (стрептококки) – неограниченное деление в одной плоскости

форма «виноградной грозди» (стафилококки) – неограниченное деление в разных плоскостях

36

«объемные тюки» (сарцины) – неограниченное деление в 3х взаимно перпендикулярных плоскостях

Бациллы могут делиться неограниченно в одной плоскости и будут получаться цепочки – стрептобациллы.

37

Словарь

1.Spp – множество видов одного рода, используется в литературе (например, чтобы не перечислять все виды стафилококков, для которых характерно токсинообразование, используется обозначение Staphylococcus spp)

2.Аксиальная нить – это комплекс периплазматических внутренних жгутиков, которые тянутся с одного конца клетки до другого и оборачиваются вокруг нее по спирали. (органоид движения спирохет)

3.Коэффициент седиментации – скорость осаждения частиц при центрифугировании. Измеряется в единицах Сведберга.

1S = 10-13 c

4.Миколовые кислоты – исключительный компонент клеточной стенки микобактерий – длинноцепочечные жирные кислоты.

5.Хемотаксис – двигательная реакция живых организмов на раздражитель.

38

Список источников

1.Review of Medical microbiology and immunology Warren Levinson

2.Virology: principles and applications John Carter

3.Prescott's Principles of microbiology Joanne M. Willey, Linda M. Sherwood, Christopher J. Woolverton

4.Руководство к практическим занятиям по микробиологии Зверев В.В., Бойченко М. Н.

5.Микробиология Зверев В. В., Бойченко М. Н.