2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Микробиология_Якубик_О_Л_,_Литвинова_З_А_2021
.pdf211
При глубокой форме болезни наблюдают несколько очагов поражения с ярко выраженными экссудативными и воспалительными процессами, инфильтрацию, большое количество фолликулярных пустул. Встречаются множественные экссудативные поражения. Все очаги покрыты засохшим серозно-гнойным экссудатом. При удалении корок обнаруживают эрозии. Часто отмечают осложнения секундарной инфекцией.
Основные возбудители трихофитии: у крупного рогатого скота, буйволов, зебу, оленей - Tr. verrucosum, реже
Tr.mentagrophytes, у лошадей – Tr. Equinum и Tr.mentagrophytes; у овец и коз - Tr. Verrucosum,
Tr.mentagrophytes, у свиней - Tr.mentagrophytes, у верблю-
дов - Tr. Verrucosum, Tr.sarkisovi, у собак и кошек –
Tr.mentagrophytes, у пушных зверей и кроликов - Tr.mentagrophytes, редко Tr. Verrucosum, у лабораторных животных (мыши, крысы, хомяки, морские свинки) - Tr.mentagrophytes, у птиц – Tr.gallinае. Этот возбудитель известен давно как возбудитель парши (фавуса) преимущественно у рода куриных. Раньше болезнь называли «белый гребень».
Микроспория. Инфекционное заболевание кожи и ее производных. Появление очагов поражения сопровождается воспалительным процессом, обламыванием и выпадением волос, иногда наблюдают поражение когтей.
Основные возбудители микроспории: у кошек и со-
бак – M.canis; у лошадей - M.eguinum, реже M.distorum и M.gypseum; у свиней, пушных зверей, кроликов и лабораторных животных - M.canis; у крупного рогатого скота - M.canis и M.gypseum. Микроспорией болеют дикие звери, а также животные зоопарков и цирков.
Лабораторная диагностика трихофитии и микроспории основана на результатах микологического исследования.
212
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии и люминесцентного анализа, выделение чистой культуры посевом на специальные питательные среды и идентификацию возбудителя по культуральноморфологическим свойствам.
Материал для исследования. В лабораторию направляют соскобы с пораженных частей тела животного вместе с корочками и чешуйками, пораженные волосы с участков, граничащих со здоровой кожей.
Микроскопия препаратов из исходного материала. Чаще готовят неокрашенные препараты. Исследуемый материал помещают в чашки Петри, измельчают ножницами и расщепляют с помощью скальпеля. Затем кусочки волос, чешуек, корочек переносят на предметное стекло, наносят каплю 10-процентного раствора гидроксида натрия или гидроксида калия и слегка подогревают над пламенем горелки до отхождения паров.
После этого добавляют каплю 50-процентного водного раствора глицерина. На приготовленный препарат накладывают покровное стекло и просматривают сначала под малым увеличением сухого объектива х8, затем с объективом х40 или с помощью иммерсионной системы.
С целью дифференциации грибов рода Trichophyton и Microsporum учитывают характер расположения спор в пораженном волосе, пользуясь критериями, приведенными в таблице 12.
Люминесцентный анализ заключается в следующем. Исследуемый материал помещают в чашки Петри на расстоянии 20 см от ртутно-кварцевой лампы ПРК-2 или ПРК- 4 с фильтром Вуда и просматривают под ультрафиолетовыми лучами в затемненном помещении.
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
213
Таблица 12 – Критерии дифференциации грибов рода Trichophyton и Microsporum
|
Trichophyton |
|
Microsporum |
|
||
Гриб располагается снаружи |
Споры мелкие – 3-5 мкм, |
|||||
или внутри пораженного во- |
беспорядочно |
располага- |
||||
лоска в виде рядов септиро- |
ются у основания |
волоса |
||||
ванного |
мицелия. Споры |
(иногда образуя чехлы) или |
||||
округлые или овальные, рас- |
на его поверхности. Споры |
|||||
полагаются цепочками, как и |
резко |
преломляют |
свет |
и |
||
мицелий, вокруг или внутри |
плотно |
прилегают |
друг |
к |
||
волоса. В чешуйках и на |
другу. Искривление мице- |
|||||
ранних |
стадиях поражения |
лия и распад его на споры |
||||
встречается ветвящийся ми- |
обусловливают |
характер- |
||||
целий. Споры Tr. verrucosum, |
ное для микроспории моза- |
|||||
Tr. Equinum более крупные, |
ичное |
расположение спор. |
||||
чем Tr.mentagrophytes |
В чешуйках |
встречается |
||||
|
|
ветвящийся мицелий. |
|
Пораженные возбудителем микроспории волосы дают яркое зеленоватое свечение. Корочки, чешуйки не светятся. Кроме того, с помощью люминесцентного анализа проводят раннюю диагностику атипичных и скрытых форм микроспории.
Обнаружение мицелия гриба и различных спор в материале – достаточное основание для постановки диагноза на дерматомикозы.
Выделение и идентификация культур возбудителей трихофитии и микроспории. Культуры выделяют в сомнительных случаях для подтверждения диагноза. Для получения чистой культуры грибов отдельные волосы или фрагменты кожи, корочки высевают на специальные питательные среды – агар Сабуро, сусло-агар, МПА, содержащий 2% глюкозы, агар Чапека и некоторые другие. Чтобы
214
освободить исследуемый материал от сопутствующей микрофлоры, перед посевом на питательные среды его обрабатывают 60-процентным этанолом в течение 5-7 минут, а затем дважды отмывают дистиллированной водой и подсушивают в термостате при 37°С, или же в питательные среды добавляют антибиотики (пенициллин, стрептомицин
идр.) из расчета 100-200 ЕД/мл. Посевы инкубируют при температуре 26-28°С 20-30 суток и более.
Увыросших культур грибов изучают культуральные
иморфологические свойства. Готовят препараты «раздавленная капля» и микроскопируют. При идентификации видов руководствуются таблицей 13.
Таблица 13 – Дифференциальные культуральные и морфологические признаки грибов – дерматофитов
Время |
Характеристика |
Вегетативная и |
||||
появления |
колоний |
репродуктивная |
||||
колоний |
|
|
|
структура грибов |
||
1 |
|
2 |
|
|
3 |
|
Tr.verrucosum |
Плотные, |
возвы- |
Септированный |
|||
(Tr.faviform) |
шающиеся |
над |
мицелий, |
цепочки |
||
30-40 дней |
средой, кожистые, |
артроспор, |
отдель- |
|||
|
складчатые |
коло- |
ные |
хламидоспо- |
||
|
нии |
серовато- |
ры, |
микроконидии, |
||
|
белого цвета, глу- |
иногда овальной, |
||||
|
боко |
врастают в |
грушевидной и па- |
|||
|
среду; |
могут быть |
лочковидной |
|||
|
без |
обильных |
форм. В отдельных |
|||
|
складок |
|
штаммах |
микро- |
||
|
|
|
|
конидии из 2-8 |
||
|
|
|
|
сегментов. |
|
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
215
Продолжение таблицы
1 |
|
2 |
|
|
|
|
3 |
|
|
|
Tr.mentagrophytes |
Колонии |
плоские, |
Гифы |
образуют ти- |
||||||
(Tr.gypseum) |
ровные, |
приподня- |
пичные |
|
спирали. |
|||||
3-4 дня |
тые, в центре в виде |
Вдоль гифа по боко- |
||||||||
|
маленького бугорка. |
вым нитям мицелия |
||||||||
|
Поверхность |
муч- |
множество |
микро- |
||||||
|
нистая. |
Молодые |
конидий |
|
округлой |
|||||
|
культуры |
белые, |
с |
формы. Редко обна- |
||||||
|
возрастом желтеют, |
руживают |
крупные |
|||||||
|
могут |
врастать |
в |
макроконидии |
вере- |
|||||
|
среду |
с |
многочис- |
тенообразной |
фор- |
|||||
|
ленными |
радиаль- |
мы с 3-8 перегород- |
|||||||
|
ными лучами. Об- |
ками. |
|
|
|
|
||||
|
ратная сторона пиг- |
|
|
|
|
|
||||
|
ментирована: |
тем- |
|
|
|
|
|
|||
|
но-красного, виш- |
|
|
|
|
|
||||
|
невого цвета. |
|
|
|
|
|
|
|
||
Tr.eguinum |
На сусло-агаре бе- |
Мицелий |
ветвящий- |
|||||||
6-9 дней |
лые |
бархатистые |
ся, |
|
множество |
|||||
|
колонии с выражен- |
округлых |
или |
гру- |
||||||
|
ными |
радиальными |
шевидных |
микроко- |
||||||
|
бороздками. |
Обрат- |
нидий. Большое ко- |
|||||||
|
ная сторона желтая. |
личество |
|
рудимен- |
||||||
|
|
|
|
|
|
тарных микрокони- |
||||
|
|
|
|
|
|
дий из 2-4 сегмен- |
||||
|
|
|
|
|
|
тов. |
Хламидоспоры |
|||
|
|
|
|
|
|
единичные |
или от- |
|||
|
|
|
|
|
|
сутствуют. |
|
|
||
Tr.sarkisovi |
На сусло-агаре пу- |
Одиночные |
микро- |
|||||||
|
шистые, ровные или |
конидии |
|
овальной |
||||||
|
кожистые, |
бугри- |
формы, |
|
хламидо- |
|||||
|
стые |
или |
складча- |
споры |
одиночные |
|||||
|
тые колонии, врас- |
или почками. |
|
|||||||
|
тают в питательную |
|
|
|
|
|
||||
|
среду. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
216
Продолжение таблицы
1 |
|
|
|
2 |
|
|
|
3 |
|
|
Tr.gallinae |
Молодые колонии |
Мицелий септиро- |
||||||||
|
гладкие, |
бархати- |
ваный. |
Много |
||||||
|
стые, белого цве- |
микроконидий. |
||||||||
|
та. |
С |
|
возрастом |
Обнаруживают |
|||||
|
складчатые, |
муч- |
макроконидии с 2- |
|||||||
|
нистые, |
поверх- |
6 |
перегородками. |
||||||
|
ность |
растрески- |
В |
старых |
культу- |
|||||
|
вается. Иногда ко- |
рах - |
хламидоспо- |
|||||||
|
лонии |
|
розового |
ры. |
|
|
|
|||
|
или |
|
малинового |
|
|
|
|
|
||
|
цвета. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
M.canis |
Первичные коло- |
Мицелий |
ветвя- |
|||||||
(M.lanosum) |
нии |
плоские, |
се- |
щийся, разной ши- |
||||||
2-4 дня |
роватого |
или |
ко- |
рины, иногда с ра- |
||||||
|
ричневого цвета с |
кетообразными |
||||||||
|
паутинистым |
рас- |
гифами. |
Много |
||||||
|
тущим краем. Об- |
макроконидий |
ве- |
|||||||
|
ратная |
|
сторона |
ретенообразной |
||||||
|
желтоватого |
цве- |
формы с 5-12 пе- |
|||||||
|
та. |
При пересевах |
регородками. |
Об- |
||||||
|
культура приобре- |
наруживают |
мик- |
|||||||
|
тает |
устойчивую |
роконидии |
(алей- |
||||||
|
белую окраску. |
роспоры) округлой |
||||||||
|
|
|
|
|
|
или |
овальной |
|||
|
|
|
|
|
|
формы. |
|
|
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
217
Продолжение таблицы
1 |
|
2 |
|
3 |
|
||
M.equinum |
На |
сусло-агаре |
Мицелий |
ветвящий- |
|||
6-8 дней |
формирует |
кожи- |
ся, септированный, с |
||||
|
стые |
складчатые |
возрастом |
|
утолща- |
||
|
колонии, |
покрытые |
ется и |
принимает |
|||
|
серовато-белым ми- |
четкообразный вид. |
|||||
|
целием. |
|
Глубоко |
В старых культурах |
|||
|
врастает |
|
в |
пита- |
множество |
интерка- |
|
|
тельную среду. От- |
лярных |
и |
терми- |
|||
|
дельные |
|
штаммы |
нальных |
|
хламидо- |
|
|
образуют |
кожистые |
спор. Иногда обна- |
||||
|
колонии желтовато- |
руживают |
|
много- |
|||
|
го или коричневого |
клеточные |
макроко- |
||||
|
цвета без воздушно- |
нидии с 5-7 перего- |
|||||
|
го мицелия. На по- |
родками; редко мик- |
|||||
|
верхности |
колоний |
роконидии |
|
|||
|
много |
очерченных |
|
|
|
||
|
радиальных |
борозд, |
|
|
|
||
|
сходящихся |
в цен- |
|
|
|
||
|
тре, у старых коло- |
|
|
|
|||
|
ний кратерообраз- |
|
|
|
|||
|
ное углубление. |
|
|
|
|||
M.gypseum |
На |
сусло-агаре |
Мицелий |
ветвящий- |
|||
|
формирует |
плоские |
ся, с ракетообраз- |
||||
|
слегка |
желтоватые |
ными утолщениями. |
||||
|
порошистые |
коло- |
Множество |
макро- |
|||
|
нии, иногда окра- |
конидий |
с |
закруг- |
|||
|
шенные |
|
в |
белый |
ленными концами и |
||
|
цвет. |
|
|
|
3-6 перегородками. |
||
|
|
|
|
|
Обнаруживают хла- |
||
|
|
|
|
|
мидоспоры и много |
||
|
|
|
|
|
микроконидий. |
218
Контрольные вопросы
1.Какие микроорганизмы вызывают микозы?
2.Какова схема лабораторного исследования микозов?
3.По каким критериям дифференцируют грибы рода
Microsporum и Trichophyton?
4.Какие плесневые грибы вызывают микозы?
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
219
Список рекомендованной литературы
1.Асонов, Н. Р. Микробиология/ Н. Р. Асонов. – Москва : Колос, 1980. – 312 с.
2.Микробиология : учебное пособие / Р. Г. Госманов, А. К. Галиуллин, А. Х. Волков, А. И. Ибрагимова. — 3-е изд., стер. — Санкт-Петербург : Лань, 2019. — 496 с. —
ISBN 978-5-8114-1180-1 // ЭБС Лань : [сайт]. — URL: https://e.lanbook.com/book/112044.
3.Госманов, Р. Г. Практикум по ветеринарной микробиологии и микологии : учебное пособие / Р. Г. Госманов, Н. М. Колычев, А. А. Барсков. — Санкт-Петербург
:Лань, 2014. — 384 с. — ISBN 978-5-8114-1625-7 // ЭБС Лань: [сайт]. — URL: https://e.lanbook.com/book/45680.
4.Колычев, Н. М. Ветеринарная микробиология и микология : учебник / Н. М. Колычев, Р. Г. Госманов. — Санкт-Петербург : Лань, 2014. — 624 с. — ISBN 978-5- 8114-1540-3 // ЭБС Лань: [сайт]. — URL: https://e.lanbook.com/book/39147.
5.Кисленко, В. Н Ветеринарная микробиология и иммунология : учебник Ч. 1. Общая микробиология / В. Н. Кисленко, Н. М. Колычев. - Москва : КолосС, 2006. -
182, [1] с - ISBN 5-9532-0404-3.
6.Костенко, Т. С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии /Т. С. Костенко. – Москва, 2001. – 272 с.
7.Костенко, Т. С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии / Т. С. Костенко, В. Б. Родионова, Д. И. Скородумов. – М.: Колос, 2001. – 344 с.
8.Плешакова, В. И. Микробиология : учебное пособие / В. И. Плешакова, Н. А. Лещѐва, Т. И. Лоренгель. — Омск : Омский ГАУ, 2019. — 75 с. — ISBN 978-5-
220
89764-826-9 // ЭБС Лань: [сайт]. — URL: https://e.lanbook.com/book/126624.
9. Ветеринарная микробиология и иммунология : учебник / Н. А Радчук [и др.] ; ред. Н. А Радчук. - Москва : Агропромиздат, 1991. - 383 с. - ISBN 5-10- 001805-4.
10. Тимаков, В. Д. Микробиология : учебник / В. Д. Тимаков, В. С. Левашев, Л. Б. Борисов. - 2-е изд., перераб.и. и доп. – Москва: Медицина, 1983. – 512 с.
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/