Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Современные_методы_лабораторной_диагностики_инфекционных_заболеваний

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
3.66 Mб
Скачать

Морфофункциональные исследования

Выявление интегральных структурнофункциональных признаков апоптоза

Определение специфичных для апоптоза изменений плазматической мембраны клеток

Оценка митохондриальных процессов

Изучение характера фрагментации ДНК

Морфофункциональные исследования

Выявление интегральных структурнофункциональных признаков апоптоза

Определение специфичных для апоптоза изменений плазматической мембраны клеток

Оценка митохондриальных процессов

Изучение характера фрагментации ДНК

Характеристика флюорохромов, применяемых для изучения апоптоза

 

Проникающая

Характеристика

 

способность в клетку

 

окраски

Краситель

 

 

 

 

 

интактная

повреждѐнная

ядро

цитоплазма

 

мембрана

мембрана

(ДНК)

(РНК)

Акридиновый

+

+

зелѐная

красно-оранжевая

оранжевый

 

 

 

 

Hoecsht 33342

+

+

голубая

нет

Hoecsht 33258

-

+

голубая

нет

DAPI (4,6-диамидин-2-

 

 

ярко

 

фенилиндол-

-

+

нет

голубая

дигидрохлорид)

 

 

 

 

 

 

 

Этидиум бромид

-

+

оранжевая

слегка красная

Пропидиум йодид

-

+

красная

нет

Морфофункциональные исследования

Выявление интегральных структурнофункциональных признаков апоптоза

Определение специфичных для апоптоза изменений плазматической мембраны клеток

Оценка митохондриальных процессов

Изучение характера фрагментации ДНК

Проточно-цитометрический анализ клеток линии Jurkat в состоянии апоптоза: до (а) и после (б) обработки камптотецином. На левом графике в нижнем правом квадранте расположены клетки, находящиеся в состоянии апоптоза (аннексин V – позитивные, PI – негативные). Клетки, не обработанные индуктором апоптоза, первоначально негативны по аннексин V-FLUOS и PI. После обработки камптотецином и инкубации клеток в течение нескольких часов выявляется довольно высокая доля клеток, находящихся в состоянии апоптоза.

Люминесцентно-микроскопическое изображение клеток линии SKW6.4, окрашенных препаратами и их сочетаниями: а – аннексин V-FLUOS (окрашены только мембраны); б – DAPI (видна характерная для апоптоза конденсация ядер); в – аннексин V-FLUOS и пропидиум йодид (четко дифференцируются апоптотические и некротические клетки).

а

б

в

Морфофункциональные исследования

Выявление интегральных структурнофункциональных признаков апоптоза

Определение специфичных для апоптоза изменений плазматической мембраны клеток

Оценка митохондриальных процессов

Изучение характера фрагментации ДНК

Морфофункциональные исследования

Выявление интегральных структурнофункциональных признаков апоптоза

Определение специфичных для апоптоза изменений плазматической мембраны клеток

Оценка митохондриальных процессов

Изучение характера фрагментации ДНК

Выявление апоптотических клеток

TUNEL-методом в эндометрии

Морфофункциональные исследования

Не позволяют определить состояние ключевых молекулярно-патологических звеньев апоптоза

Соседние файлы в папке Клинические и лабораторные анализы