2 курс / Гистология / Морфо_–_функциональная_характеристика_лимфатической_системы_легких

62

Для введения ЧИ в дыхательную систему кролика разработали и

использовали «Устройство для введения порошкообразных препаратов в дыхательную систему мелких животных» (Ткаченко Л.В. и др., 2009 [167,

4 с.] [245, c. 69-74]; Коновалов В.К. и др., 2014 [185, 93 с.]) (рисунок 11; 12).

Устройство состоит из спейсера (маски) (рисунок 11.А.В.1), куда вставляется пакет полиэтиленовый (рисунок 11.А.2). Спейсер (рисунок

11.А.В.1) посредством трубки для подачи аэрозоля (рисунок 11.А.В.8),

переходника (рисунок 11.А.В.9) и крышки (рисунок 11.А.В.4) соединен с камерой для создания аэрозоля (рисунок 11.А.В.3). Через трубку для нагнетания воздуха (рисунок 11.А.В.6) и переходника (рисунок 11.А.В.7) в

камеру (рисунок 11.А.В.3) нагнетается воздух при сжатии груши резиновой

(рисунок 11.А.В.5).

Важную роль в успешной работе устройства играл материал, из которого были сделаны отдельные детали предлагаемого устройства. Мы рекомендуем использовать следующие материалы:

-спейсер (маска) - плотный прозрачный пластик;

-пакет полиэтиленовый - плотный прозрачный полиэтилен;

-камера для создания аэрозоля - толстое прозрачное стекло;

-крышка для камеры - плотный пластик;

-груша резиновая - эластичная прочная резина;

-трубка для нагнетания воздуха в камеру - эластичная прочная резина,

желательно прозрачная;

-переходники - плотный пластик;

-трубка для подачи аэрозоля в спейсер - эластичный плотный пластик,

желательно прозрачный.

Принцип работы устройства. Животное помещается на горизонтальную поверхность столешницы. На мордочку надевают пакет полиэтиленовый (ри-

сунок 11.А.В.С.2.), в котором вырезано отверстие диаметром 1,5 см для но-

сового зеркальца. Далее мордочку помещают в спейсер (рисунок 11.А.С).

64

Использование пакета полиэтиленового способствует снижению до минимума выхода аэрозоля из спейсера и его попадания в атмосферу, что позволило дозировать объем ингалируемого аэрозоля.

В камеру для создания аэрозоля (рисунок 11.А.В.3) помещается индикатор.

Камера закрывается крышкой (рисунок 11.А.В.4), в которой находятся два отверстия для переходников (рисунок 11.А.В.7.9). При сдавливании резиновой груши (рисунок 11.А.В.5) воздух по трубке (рисунок 11.А.В.6) и проводнику

(рисунок 11.А.В.7) поступает в камеру (рисунок 11.А.В.3), где образуется аэрозоль. Готовый аэрозоль по трубке для подачи аэрозоля в спейсер (рисунок

11.А.В.8) и переходнику (рисунок 11.А.В.9) подается в спейсер (рисунок

11.А.В.1).

Особенностями применения данного устройства является то, что его составные части не изменяются со временем (от исследования к исследованию);

оно легко в использовании и универсально для любых видов животных.

Во время работы исследователю необходимо использовать перчатки резиновые, маску медицинскую и очки.

После работы устройство разбирается, составные части промываются теплой проточной водой, дезинфицируются по общепринятой методике.

Данное устройство было апробировано нами и на 3 представителях мелкого рогатого скота.

Таким образом, «Устройство для введения порошкообразных препаратов в дыхательную систему мелких животных» приемлемо для работы с любыми лабораторными, домашними и сельскохозяйственными животными (Коновалов В.К. и др., 2002). Оно позволяет ингалировать в Л. животному мелкодисперсный порошкообразный аэрозоль при спонтанном (самопроизвольном) дыхании

(рисунок 12.А.В.1). Животное при этом находится в не наркотизированном состоянии.

Достоверность полученных результатов подтверждена гистологическими исследованиями (рисунок 12.С.2-4).

66

При помощи разработанного Устройства проводили прижизненное

аэрозольное введение мелкодисперсного порошкообразного индикатора в дыхательную систему экспериментального животного по методу Коновалова В.К. и др. (2002).

Животное помещается на столешницу, через 15-20 мин на мордочку животного надевали спейсер с полиэтиленовым пакетом. Еще через 10-15

минут начинали ингаляцию. Это время было необходимо для того, чтобы животные с разным типом нервной системы могли адаптироваться и делать равномерные дыхательные движения (Васева Р.М., 1991).

Визуальным подтверждением подачи аэрозоля являлось осаждение частиц индикатора на спейсере (маске), полиэтиленовом пакете и мордочке животного (рисунок 12.В.1).

После этого проводили эвтаназию животного через 1, 2, 3 … ,48, 72

часа, 1 мес. - период ожидания после аэрозольного введения препарата в дыхательную систему животного (в соответствии с нормами действующего международного и РФ законодательства).

Далее - патологоанатомическое вскрытие по методу Шора (Жаров А.В. и др., 2000), с описанием по общепринятой схеме.

Исходя из условий нашего эксперимента, внутритканевую инъекцию массой ТМК проводили в течение 1560 мин после эвтаназии животного.

Для одновременной визуализации различных фрагментов и долей Л., ин-

тра – и экстраогранных ЛУ и ЛС легких, артериальной, венозной системы и бронхиального дерева разработали и использовали «Способ лимфо - бронхо -

ангио – поликолорирования легких и их регионарных ЛУ взрослого кролика универсальной массой ТМК (массой Ткаченко - Малофеева – Коновалова)»

(рисунок 13; 14.А-С.1-4; 15.А.В; 16.В-D) (Ткаченко Л.В. и др., 2010 [178, с.

120-122]).

Представленный способ состоит из следующих этапов:

- разработка и испытание универсальной массы ТМК для поликолори-

рования (одновременного использования нескольких цветов массы ТМК)

68

красного акрила можно взять белый. Приготовление белой массы ТМК иден-

тично.

Принцип использования массы ТМК. Предварительно помещали орган

(целиком) в теплую воду на 30-60 минут. Не вынимая Л. из теплой воды,

вводили массу небольшими порциями в паренхиму Л. и ЛУ, главный правый и левый Бр., крупные кровеносные сосуды с перерывами, в которых прово-

дили легкий массаж ткани, визуально контролируя процесс. Для введения массы использовали шприц с вклеенной иглой.

Масса ТМК приемлема для макроскопических исследований (например,

препарирования) сосудов, для этого необходимо лишь увеличить концентра-

цию акрила, который хорошо затвердевает.

Для микроскопирования интраорганных ЛС или ЛУ легких необходимо учитывать качественные характеристики акрила и объем массы,

инъецируемой в орган (Исследование лимфатического узла … [77]).

В нашей работе материал с поликолорированной лимфатической,

сосудистой и бронхиальной системами массой ТМК (рисунок 14.А-C;

15.А.В.1.2) фиксировали по общепринятым методикам и проводили дальнейшие гистологические исследования (рисунок 16.D-I.1-7; 19.A-К.1-12)

(Коржевский Д.Э., 2005 [97] [98, с. 31-46], 2007).

Массу ТМК можно использовать совместно с другими массами,

например Герота (рисунок 14.А.1.5).

Следующий этап лимфо - поликолорирование массой ТМК.

Для визуализации интра - и экстраорганной лимфатической системы Л.

использовали массу ТМК различного цвета, например:

В паренхиму левого трахеобронхиального ЛУ вводили малиновую массу ТМК, в правый трахеобронхиальный ЛУ - зеленую массу ТМК. В паренхиму левой краниальной доли – желтую, левой каудальной – салатову, правой кра-

ниальной – оранжевую, правой средней – коричневую, правой каудальной – фиолетовую, а правой добавочной – массу ТМК цвета охры.