6 курс / Гастроэнтерология / Клинические_перспективы_гастроэнтерологии,_гепатологии_2004_№03

Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии

■

3, 2004

печени у крыс [5, 12, 23, 32, 49, 82,

пользовали

D галактозаминовую

ную реакцию с маркерами оваль

96, 103], а недавно их удалось

модель повреждения. Авторы уста

ных клеток (OV) крыс, так как при

выделить [42]. В связи с характер

новили, что пролиферация стволо

обычной световой микроскопии их

ными морфологическими

особен

вых клеток печени крыс начинается

не всегда можно отличить [73].

ностями

(овальные ядра,

скудная

через 24 ч в портальной зоне рядом

Р. Ruck и соавт. описали популяцию

светлая

цитоплазма) их

назвали

с желчными протоками, далее клет

мелких

эпителиальных

клеток с

овальными клетками [22]. У грызу

ки предшественники распространя

овальными ядрами при различных

нов эти клетки распространяются

ются от портальной зоны в паренхи

подтипах

гепатобластомы

[76].

от канальцев Геринга (холангиол)

му органа. С 3 го по 5 й день клетки

Они обнаружили моноклональные

за пределы пограничной пластинки

формируют псевдопротоковые и ос

антитела к OV 1 и OV 6, а также

[26], формируя древовидно раз

тровковые

структуры, продуцируя

к цитокератину 7 (маркеру диффе

ветвленные протоки между пече

при этом гамма глутамилтранспеп

ренцированного желчного

эпите

ночными балками, а затем диффе

тидазу (маркер гепатоцитов плода),

лия) и альбумину (маркеру зре

ренцируются в гепатоциты. Выска

а некоторые клетки – мРНК для аль

лых гепатоцитов).

зывается также мнение, что эти

бумина. Часть вновь образованных

В исследовании С.С. Hsia и со

клетки располагаются в перипор

клеток обладала морфологически

авт. также была

подтверждена

тальной зоне [81, 96]. Предполо

ми свойствами, промежуточными

перекрестная реакция

овальных

жить, что их источником является

между клетками предшественника

клеток человека, содержащих мо

желчный эпителий, позволили дан

ми и гепатоцитами. Кроме того, в пе

ноклональные антитела, и оваль

ные, полученные при индукции кан

чени наблюдали пролиферацию

ных клеток крыс у пациентов с HBV

церогенеза в печени крыс путем

зрелых гепатоцитов, достигающую

ассоциированным печеночно кле

использования в течение 60 дней

максимума к 5 му дню исследова

точным раком [34]. Помимо этого

бесхолиновой диеты, содержащей

ния, причем эти клетки не подверга

представленные авторами

клетки

0,1% этионина [51].

лись редифференцировке, так как у

обладали положительным действи

Выявлено, что овальные клетки

них не было маркеров фетальных

ем на цитокератины 8, 18, 19 и

формируют структуры, подобные

клеток.

продуцировали альфа фетопроте

желчным протокам. На поверхнос

Таким образом, было подтверж

ин, что позволило предположить,

ти овальных клеток как нормаль

дено существование по меньшей

что именно пролиферация этих

ных, так

и гиперплазированных

мере двух источников регенерации

клеток приводит к повышению со

желчных протоков обнаружены ци

печеночной ткани. В пользу этого

держания альфа фетопротеина в

токератины 7 и 19 (маркеры били

свидетельствуют данные Н.С. Fiegel

сыворотке крови

в

предраковой

арного эпителия), 8 и 18 (маркеры

и соавт., которые выделили из пече

стадии заболевания.

эпителиальных клеток печени) при

ни плодов крыс, а затем получили

Т. Roskams и соавт. использова

отсутствии виментина и

десмина

рост колоний двух типов клеток.

ли для изучения маркеров стволо

(маркеров мезенхимальной и мы

Одни из них экспрессировали мар

вых печеночных клеток

человека

шечной тканей). Маркеры альбу

кер стволовых клеток Thy1 и цито

ткань печени при фокальной ноду

мина выявлены только у небольшо

кератин 18, а также на ранних ста

лярной

гиперплазии, поскольку

го числа клеток, морфологически

диях размножения – альбумин, а на

при этом заболевании в узлах со

напоминающих мелкие гепатоци

поздних – альфа фетопротеин, т. е.

держится

большое

количество

ты. Кроме того, установлена зави

данный тип клеток являлся предше

желчных

протоков.

На

клетках

симость степени пролиферации от

ственником стволовых печеночных

желчных протоков обнаружены ан

площади билиарного дерева и сек

клеток взрослой особи. Другие

титела к цитокератинам 7 и 19

реции желчных кислот. Эти же

клетки экспрессировали альбумин,

(специфичным для желчных прото

параметры влияют и на выражен

а на ранних стадиях – альфа фето

ков), молекуле адгезии

нервных

ность гиперплазии желчных прото

протеин, что свидетельствует о том,

клеток, хромогранину А, свиде

ков при их обструкции.

что они могли дифференцировать

тельствующему о

вовлечении в

В большом числе исследований,

ся в зрелые гепатоциты у взрослых

процесс

желчных

протоков. При

в основном на крысах, была под

крыс [25].

этом мелкие клетки с овальными яд

тверждена бипотенциальная спо

У человека клетки, подобные

рами также экспрессировали дан

собность овальных клеток. Это ста

овальным, были выявлены при раз

ные маркеры (кроме хромограни

ло возможным благодаря детекции

личных воспалительных, холестати

на А). На прилегающих к желчным

специфичных для гепатоцитов и кле

ческих и онкологических заболева

протокам перисептальных гепато

ток билиарного эпителия энзимов и

ниях печени. Установлено, что у

цитах были выявлены хромогра

анализу фенотипических маркеров

человека, как и у грызунов, стволо

нин А, цитокератин 7 и OV 6. По

[17, 51, 65, 90]. Для оценки

вые клетки располагаются в ка

лученные авторами данные под

течения процессов регенерации в

нальцах Геринга [94]. Их иденти

твердили

стволовые

свойства

печени М.D. Dabeva и соавт. ис

фицировали, используя перекрест

овальных клеток печени человека,

Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии

■

3, 2004

хотя и не выявили их высокоспеци

[2]. Клональным анализом под

Клетки костного мозга. В каче

фичных маркеров [73].

тверждено происхождение культу

стве

потенциального источника

Поскольку OV отсутствуют на

ры из одной клетки предшествен

стволовых клеток печени рассмат

клетках желчных протоков в непо

ника. При

введении

полученных

риваются клетки

костного

мозга.

врежденной печени, с их помощью

клеток в портальную вену атимич

Это предположение подтвержда

можно подтвердить роль стволовых

ной мыши половина из них встраи

ется обнаружением на поверхнос

клеток в процессах регенерации

валась в паренхиму печени. Через

ти овальных клеток крыс CD34,

[14]. ОV 6 был обнаружен на клет

3 нед пересаженные клетки экс

Thy1, мРНК, протеинов c kit (рецеп

ках пролиферирующих желчных

прессировали и альбумин, и аль

тора для фактора роста стволовых

протоков, перидуктальных клетках

фа фетопротеин, но утратили спо

клеток) и рецептора мРНК flt 3, ко

и гепатоцитах печеночной дольки.

собность экспрессировать цитоке

торые также выявляют на гемопоэ

При этом у пациентов с наследст

ратин 19, что говорит о дальней

тических стволовых клетках [6, 25,

венными (дефицит альфа 1 анти

шей дифференцировке этих клеток

62, 67]. Аналогичные данные пред

трипсина, билиарная атрезия) и

в гепатоциты.

ставили E.R. Lemmer и соавт. [50],

аутоиммунными

заболеваниями

J.S. Sandhu и соавт. использо

которые обнаружили на 0,9% кле

печени (первичный билиарный цир

вали

клетки

фетальной печени

ток печени плода человека CD34+,

роз и первичный склерозирующий

крыс для пересадки особям со здо

а затем показали, что небольшая

холангит) на клетках пролифериру

ровой печенью и животным, полу

часть этих клеток (3–8%) позитивна

ющих желчных протоков были так

чавшим ретрорзин. У животных

в отношении цитокератинового

же идентифицированы специфич

обеих групп были выявлены следу

маркера САМ 5.2.

ные для нормального билиарного

ющие особенности регенерации:

H.A. Crosby и соавт. [15] полу

эпителия цитокератин 19 и челове

– в нормальной печени транс

чили сходные результаты при изу

ческий эпителиальный антиген 125.

плантированные клетки формиро

чении

культуры

клеток

печени

Представляет интерес тот факт,

вали

кластеры

гепатоцитов

из

больных циррозом. Так, CD34+ и

что на вновь образованных клетках

800–1000

клеток,

протоковые

c kit были выявлены на клетках пор

желчного эпителия человека в отли

структуры,

анастомозирующие

с

тальных трактов рядом с желчными

чие от таковых у крыс одновремен

желчными протоками

донора,

и

протоками, как и цитокератин 19,

ное выявление СК 19 и OV 6 было

смешанные

клеточные кластеры

и CD31 (маркер

эндотелиальных

достаточно редким, что подтверж

гепатоцитов и холангиоцитов, при

клеток).

дает предположение о нескольких

этом

регенерация

составила

Таким образом, небольшой про

источниках клеточного роста.

5–10% от исходной массы печени;

цент исследованных клеток коэкс

О существовании стволовых

– при применении ретрорзина

прессировал маркеры гемопоэтиче

клеток в печени человека свиде

трансплантированные

клетки об

ской стволовой клетки и эпителиаль

тельствуют также данные элек

разовывали

большие

многодоль

ной клетки. Это позволило авторам

тронной микроскопии. В перипор

ковые структуры, а степень регене

утверждать, что они идентифициро

тальной зоне у больных, страдаю

рации была существенно выше –

вали стволовые клетки печени.

щих различными

заболеваниями

от 60 до 80%.

Способность стволовых клеток

печени с поражением желчных

Отмечены также отличия от ге

костного мозга служить источником

протоков, выявляют три типа кле

патоцитов взрослых особей:

не только клеток крови, но и других

ток небольших размеров: I тип –

1) фетальные клетки продолжа

клеток, в том числе гепатоцитов,

овальной формы с овальными яд

ли пролиферировать к 6 му месяцу

открыла перспективы их использо

рами, II тип – с чертами клеток

после трансплантации, а взрослые

вания

для восстановления

тканей

желчного эпителия, III тип – с при

пролиферировали только 1 мес;

после различных повреждений, по

знаками гепатоцеллюлярной диф

2) размеры

и

количество фе

скольку данные клетки достаточно

ференцировки [20], что подтверж

тальных кластеров увеличивались

легко изолировать, культивировать

дает существование бипотенци

на протяжении периода наблюде

и хранить, их можно вводить непо

альной клетки предшественника.

ния, а зрелых – уменьшались;

средственно в системный кровоток,

Идентификация

бипотенциаль

3) фетальные клетки дифферен

благодаря чему они легко могут

ных клеток позволила начать ис

цировались в гепатоциты при попа

достичь нужного органа [43].

следования по их трансплантации,

дании в паренхиму печени, а в хо

Некоторые авторы сообщают о

однако пока получены лишь экспе

лангиоциты – только в том случае,

способности гемопоэтических ство

риментальные данные. J. E. Аllain

если находились рядом с желчными

ловых клеток дифференцироваться

и соавт. наблюдали рост in vitro ко

протоками донора, зрелые же гепа

практически во все клетки: миоциты,

лонии бипотенциальных клеток фе

тоциты не образовывали желчных

клетки хряща, эндотелиальные, эпи

тальной печени, на которых были

протоков, что

свидетельствовало

телий бронхов, нервные клетки, ге

выявлены маркеры как гепатоци

об утрате

ими

бипотенциальных

патоциты [37, 43, 80].

тов, так и клеток желчного эпителия

свойств [78].

Как уже отмечалось, возможно

сти регенерации печени после пе

что привело к восстановлению

номен

трансдифференцировки

ресадки костного мозга были изуче

нормальной функции печени.

клеток костного мозга может про

ны в ряде исследований. Пересадка

Х. Wang и соавт. [101] прицель

исходить и в отсутствие некроза

клеток костного мозга с Y хромосо

но исследовали кинетику роста ге

печени и необходимости репара

мой крысе самке показала, что на

патоцитов на такой же модели, но

ции. Кроме того, не выяснено, мо

13 е сутки, когда овальные клетки

трасплантировали костный мозг;

гут ли

полипотентные стволовые

начинают

дифференцироваться в

они установили, что этот процесс

клетки костного мозга трансдиф

гепатоциты, часть клеток печени

течет очень медленно и регенера

ференцироваться или они и гепа

(0,14%) оказывала положительное

ция остается неполноценной. Еди

тоциты имеют общего, более при

воздействие на Y хромосому. Сле

ничные

гепатоциты

донорского

митивного костномозгового пред

довательно, клетки костного мозга

происхождения были обнаружены

шественника [16, 66].

были источником стволовых клеток

только на 7 й неделе после пере

В ряде исследований отмечено,

печени [66].

садки костного мозга, образовы

что печень взрослого человека, как

При трансплантации костномоз

вали печеночные дольки на 11 й

и эмбриональная, обладает гемо

говых клеток, позитивных по дипеп

неделе и к 22 й неделе составляли

поэтическим потенциалом [31]. При

тилпептидазе IV, крысе с отсутствием

около 30% печеночных клеток. При

этом стволовых гемопоэтических

в крови энзима гепатоциты проявля

этом до полного восстановления

клеток в печени в 6 раз больше, чем

ли ферментативную активность со

костного мозга регенерации в пе

в периферической крови, что срав

сходной частотой (0,16%), что под

чени не было, несмотря на ее ис

нимо с костным мозгом, и эти клетки

твердило это предположение. Ана

ходное

повреждение

у данных

могут дифференцироваться по эрит

логичные данные получены при пе

животных.

роидному и миелоидному росткам

ресадке костного мозга от носителя

Аналогичные результаты полу

in vivo, а также мигрировать в кост

гена главного комплекса гистосов

чены и у человека. В печени женщи

ный мозг [13, 85, 91]. Используя мо

местимости II класса L21 6 реципи

ны, подвергшейся трансплантации

ноклональные антитела против спе

енту с отсутствием этого гена, у кото

костного мозга, были обнаружены

цифических клеточных маркеров,

рого он был обнаружен в области

клетки с Y хромосомой. У реципиен

авторы установили, что все полипо

обычного

расположения

пролифе

та мужского пола после удаления в

тентные стволовые клетки экспрес

рирующих овальных клеток. Иссле

связи с рецидивом заболевания пе

сируют CD34 [41], и этот маркер яв

дователи

подтвердили

зрелость

ресаженной от женщины донора

ляется в настоящее время единст

«костномозговых» гепатоцитов де

печени в трансплантате также были

венным, который позволяет иденти

текцией специфических маркеров,

найдены клетки с мужским феноти

фицировать указанные клетки. На

Н4 и С САМ (специфическая молеку

пом. Частота обнаружения гепато

поверхности 95% из них были также

ла клеточной адгезии гепатоцитов).

цитов со свойствами клеток донора

выявлены CD56, CD7, CD19, ассо

Таким образом, было проде

у реципиентов костного мозга ко

циированные с дифференцировкой

монстрировано, что регенерация

леблется в широких пределах. По

по лимфоидному ростку [30], в про

печени при пересадке

костного

данным разных авторов, для гепато

тивоположность костному мозгу, где

мозга частично осуществляется за

цитов она составляет от 0,5 до 40%

на поверхности большинства клеток

счет донорских стволовых клеток.

и для холангиоцитов – от 4 до 38%

(74%) выявляют маркеры миелоид

Несмотря на перспективность

[1, 16, 40, 92, 93].

ной линии (CD33) [11, 47]. CD7 явля

использования костного мозга для

Исследование с использовани

ется маркером естественных килле

регенерации гепатоцитов, необхо

ем индуцированных гранулоцитар

ров, что подтверждает гипотезу о

димо подчеркнуть, что число вновь

ным колониестимулирующим фак

том, что печень – экстратимический

образованных «костномозговых»

тором (Г КСФ) CD34 стволовых

очаг созревания этих клеток.

печеночных клеток очень мало для

клеток показало, что они также

Таким образом, высказывается

полноценной репарации. Это мож

трансдифференцируются в гепато

предположение, что основная роль

но было бы объяснить нормальным

циты, составляя 4–7% клеток пече

популяции гемопоэтических стволо

состоянием печени реципиентов в

ни реципиента (идентификацию

вых клеток печени – формирование

большинстве описанных

случаев.

также

проводили

по

наличию

противоопухолевого иммунитета,

Данное предположение подверж

Y хромосомы) [16]. Этот вопрос

хотя лимфоциты могут попадать в

дается, например, исследованием

недостаточно ясен и может слу

печень и по системе воротной вены

Е. Lagasse и соавт. [46]: мышам,

жить основой для дальнейших ис

в ответ на инфекцию, адгезируясь к

в крови

которых отсутствовала

следований.

клеткам эндотелия [48].

фумарилацетоацетатгидролаза

Не установлена также четкая

Остается неясным, существует

(модель тирозинемии I типа), внут

связь между выраженностью кле

ли отдельная популяция специали

ривенно вводили всего 30 (!) высо

точного ответа и степенью по

зированных клеток крови, способ

коочищенных стволовых

гемопоэ

вреждения печени.

Исходя из

ных дифференцироваться в пече

тических клеток взрослых особей,

представленных выше данных фе

ночные клетки, или любые гемопоэ

Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии

■

3, 2004

тические клетки в зависимости от

стью [6]. При этом c kit обнаружен

участвуют и в регенерации печени.

микроокружения могут функциони

на небольшом количестве клеток

М. Korbling и соавт. исследова

ровать как стволовые клетки пече

портальных

трактов нормальной

ли биопсийный материал кожи, пе

ни [89].

печени; число таких клеток возрас

чени и желудочно кишечного трак

N.D. Theise и соавт. установили,

тало у больных циррозом. Наи

та

больных

гематологическими

что такими свойствами обладает

большее их содержание отмечено

опухолями и раком молочной же

субпопуляция CD34 клеток [92].

у пациентов с фульминантной пе

лезы после химиотерапии или хи

Большинство исследователей не ус

ченочной недостаточностью, у ко

миорадиотерапии, подвергшихся

тановило фенотипических отличий

торых часть c kit позитивных клеток

трансплантации

гемопоэтических

между донорскими клетками, диф

находилась

в

желчных протоках.

стволовых клеток (CD34+), получен

ференцирующимися в клетки крови

Это позволило предположить сле

ных методом афереза из перифе

или в какие либо другие клетки, на

дующее: во первых, данные клетки

рической

крови

[40].

Доноры

пример печеночные [43]. Напротив,

были клетками предшественника

4

дня предварительно

получали

G.H. Danet и соавт. выделили от

ми (с kit можно считать их потенци

рекомбинантный

человеческий

дельную популяцию стволовых кле

альным маркером); во вторых, сис

Г КСФ в дозе 12 мкг/ кг/сут. В био

ток человека, способную диффе

тема c kit рецептор/лиганд вовле

псийном

материале обнаружены

ренцироваться и в гепатоциты, и в

кается в процессы репарации пече

донорские клетки, причем в пече

клетки крови [19]. На поверхности

ночной ткани.

ночной ткани – уже на 13 е сутки.

таких клеток, полученных из костно

Необходимо отметить, что c kit

Эти данные подтвердили способ

го мозга взрослых доноров и из

является рецептором, относящим

ность циркулирующих стволовых

плацентарной крови,

обнаружен

ся к III типу рецепторов семейства

клеток дифференцироваться в эпи

рецептор для молекулы комплемен

тирозинкиназ,

с которым

связан

телиальные

клетки и гепатоциты,

та C1q, что можно было бы исполь

так называемый фактор стволовых

хотя роль этих клеток в процессах

зовать для их выделения.

клеток (известный также как kit ли

регенерации

в настоящее время

Необходимо также выявить ме

ганд, или фактор роста тучных кле

неясна.

ханизмы, регулирующие процессы

ток, или поддерживающий фактор).

Трансплантация клеток плацен

дифференцировки стволовых кле

Установлена ключевая роль этого

тарной

крови.

Перспективным

ток печени. Возможно взаимодей

цитокина в гемопоэзе [10]. Для SCF

представляется также использова

ствие комплекса факторов. Наибо

и c kit рецептора определены хро

ние плацентарной крови. Свойст

лее вероятные из них – влияние

мосомные локусы и выявлено, что

ва гемопоэтических стволовых кле

экстрацеллюлярного

матрикса,

отсутствие протеина SCF или изме

ток из этого источника достаточно

растворимых и связанных с мемб

нение положения рецептора c kit

хорошо изучены. Их концентрация

раной клетки лигандов, контроли

на поверхности клетки у мышей

в плацентарной крови равна или

рующих процессы клеточного рос

приводит к смерти внутриутробно

превышает таковую в костном моз

та, дифференцировки и морфоге

или в перинатальный период от тя

ге и существенно больше, чем в пе

неза [16, 60].

желой макроцитарной анемии.

риферической крови взрослого че

Роль микроокружения проде

У человека также стали ясными

ловека [56]. При выращивании их

монстрирована при введении куль

структура SCF и его распределе

in vitro образуется большее число

туры стволовых клеток, полученных

ние в тканях. Этот фактор продуци

колоний по сравнению с таковым

из печени взрослой крысы самца,

руют эпителиальные клетки кожи и

клеток взрослых людей, а наличие

особи самке. В миокарде реципи

кишечника, фибробласты, гемопо

у этих клеток более длинных тело

ента через 6 нед были обнаружены

этические стволовые клетки и клет

мер свидетельствует о способнос

клетки с Y хромосомой [55]. Хоро

ки предшественники (CD34+), он

ти к неограниченному делению без

шо изучена роль рецептора для

обнаружен и в тимусе. При хрони

дифференцировки в определенный

фактора роста стволовых клеток

ческих анемиях концентрация SCF

клеточный тип [29]. Длительное их

(SCF) и показано, что у животных по

в сыворотке крови повышается.

хранение

(криоконсервация)

не

вышена экспрессия генов SCF и его

приводит к потере заместительных

рецептора (c kit) на

поверхности

Циркулирующие

способностей [75]. Осуществлены

овальных клеток крыс, подвергших

успешные

трансплантации

этих

стволовые клетки

ся частичной гепатэктомии [28].

клеток при гематологических забо

Аналогичные данные получены у

Трансплантация

клеток

леваниях, при низкой частоте раз

людей: U. Baumann и соавт. при изу

взрослых доноров. Известно, что в

вития болезни трансплантат про

чении мРНК системы c kit рецепто

крови содержатся стволовые клет

тив хозяина [36, 44, 74, 98].

ра/лиганда у детей установили по

ки, способные полностью восста

S. Kakinuma и соавт. изучали

вышенную концентрацию данной

новить гемопоэз после абляции ко

рост культур стволовых клеток, по

мРНК у половины больных с фульми

стного мозга. Это позволяет пред

лученных из плацентарной крови, в

нантной печеночной недостаточно

положить, что данные клетки также

присутствии

различных

факторов

Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии ■

3, 2004

роста и дифференцировки [36]. Ге

мальные и происходят из вентраль

только протоковые

клетки,

была

патоциты

идентифицировали по

ной части кишечной трубки [33, 77,

эффективной у 9%

реципиентов,

наличию мРНК для альбумина. Ус

87, 90, 105, 106]. Доказательства

что не подтвердило предположе

тановлено, что необходимым для

этого предположения получены в

ния о локализации стволовых кле

их роста является фактор роста ге

ряде

исследований

на животных

ток в протоках

поджелудочной

патоцитов

(HGF),

а наибольшая

моделях. Самые известные из них –

железы. Несмотря на очевидность

концентрация альбумина опреде

работы M.S. Rao и соавт. [68–70].

того факта, что

анатомическое

ляется к 21 му дню культивирова

У молодых крыс, которых переста

расположение этого органа суще

ния при использовании сочетания

ли вскармливать грудным молоком,

ственно затрудняет забор клеток,

рекомбинантных

человеческих

из диеты исключали медь, вследст

проведенные исследования

под

факторов роста фибробластов 1 и

вие чего развивалась полная атро

тверждают общность клеток пред

2 (FGF 1, FGF 2), рекомбинантного

фия островков поджелудочной же

шественников панкреатических и

человеческого

ингибирующего

лезы. Через 8 нед медь вновь вклю

печеночных клеток, поэтому ство

лейкемию фактора (LIF), рекомби

чали в диету, при этом в панкреати

ловые клетки печени, возможно,

нантного

человеческого фактора

ческих протоках обнаружили клет

могут быть использованы для вос

роста стволовых клеток (SCF) и

ки с морфологическими и функцио

становления бета клеток.

HGF. Полученная культура клеток

нальными характеристиками гепа

была успешно пересажена мышам

тоцитов. Если медь не добавляли в

Эмбриональные

с тяжелым комбинированным им

диету, то возникала пролиферация

клетки

мунодефицитом, которым до этого

клеток, очень похожих на овальные

удалили 1/

3

печени и инъецировали

клетки печени, которые при транс

Свойства

эмбриональных

2 ацетаминофлюорен. Необходи

плантации дифференцировались в

стволовых клеток

хорошо изуче

мо отметить, что общее число ге

гепатоциты [18].

ны, хотя при их практическом при

патоцитов

донора

составило

Целью исследования X. Wang

менении возникает ряд проблем.

0,1–1,0% от числа всех гепатоци

и соавт. [100] было выяснить, явля

Использование этих клеток доста

тов реципиентов к 55 й неделе по

ются

ли

обнаруженные

клетки

точно заманчиво, так как они спо

сле трансплантации,

что

могло

функционально полноценными и

собны делиться экспоненциально

быть связано с отсутствием необ

можно ли их использовать с тера

длительный период [83], тогда как

ходимого микроокружения, а так

певтическими целями, а также точ

при выращивании культуры клеток

же с нарушением пролиферации и

но установить их

локализацию

постнатальных тканей («взрослых»

дифференцировки пересаженных

(в самих протоках или перидукталь

стволовых клеток)

наблюдается

клеток 2 ацетаминофлюореном.

но). Клетки были взяты у самцов

так называемый

асимметричный

Итак,

плацентарную

кровь

взрослых мышей, и получена их

рост, т. е. старение культуры. Кро

можно рассматривать как потен

культура. В дальнейшем она была

ме того, эмбриональные клетки

циальный источник стволовых кле

трансплантирована в селезенку

могут быть источником клеток лю

ток печени.

мышей самок с дефицитом фума

бого типа. Но существует и другая

рилацетоацетатгидролазы. Через

сторона проблемы: опухолевый

Клетки поджелудочной

4 нед в печени 29% реципиентов

потенциал стволовых клеток, полу

нашли узлы из трансплантирован

ченных от эмбрионов (формирова

железы

ных клеток (с нормальной активно

ние тератом).

Несмотря на то что именно

стью фермента), через 8 нед выжи

Стволовые клетки выделяют из

клетки костного мозга представля

ли 15%, хотя у 2 из них развилась

внутренней массы бластоцисты [95,

ются наиболее

интересными с

гепатокарцинома. У 4 мышей с ус

97]. Перспективным представляет

практической точки зрения для воз

пешной

трансплантацией

актив

ся получение эмбрионов методом

можного их использования в транс

ность

изначально

дефицитного

экстракорпорального оплодотво

плантологии, нельзя игнорировать

фермента варьировала от 30 до

рения [95]. У человека для изоляции

имеющиеся данные о способности

90% по сравнению с таковой у здо

стволовых эмбриональных клеток

других клеток дифференцировать

ровых животных, и ряд параметров

используют методику иммунохи

ся в клетки печени. В частности

(АсАТ, билирубин, уровень амино

рургии, обрабатывая материал ан

Х. Wang и соавт. исследовали

кислот, сукцинилацетат – основ

тителами к трофобласту, вызываю

свойства

клеток

поджелудочной

ной маркер наследственной тиро

щими его комплементзависимую

железы [100]. Существует гипоте

зинемии) был в пределах нормы.

деструкцию, и оставляя интактными

за об общей стволовой клетке для

Таким

образом,

регенератив

клетки внутренней массы. Эти клет

гепатоцитов, клеток желчных и пан

ная способность панкреатических

ки размножают на культуре фиб

креатических протоков, экзо и эн

стволовых клеток

сравнима по

робластов, полученных из эмбрио

докринных клеток поджелудочной

эффективности с печеночными. Пе

нов мышей в середине гестации

железы, так как все они эндодер

ресадка

культуры,

содержащей

[61]. Такой способ получения коло

identification of a human hepatic progenitor

3 methyl 4 dimethylaminoazobenzene //

// Science. – 1994. – Vol. 266. –

cell? // Hepatology. – 1999. – Vol. 30 (1). –

Cancer Res. – 1956. – Vol. 16. – P. 142–148.

P. 2011–2015.

P. 112–117.

23. Fausto N., Lemire J.M., Shojiri N. Cell

39. Klug M.G., Soonpaa M.H., Koh G.Y.

7. Betts D.H., King W.A. Telomerase acti

lineages in hepatic development and the iden

et al. Genetically selected cardiomyocytes

vity and telomere detection during early

tification of progenitor cells in normal and

from differentiating embryonic stem cells form

bovine development // Dev. Genet. – 1999. –

injured liver // Proc. Soc. exp. Biol. Med. –

stable intracardiac grafts // J. Clin. Invest. –

Vol. 25. – P. 397–403.

1993. – Vol. 204. – P. 237–241.

1996. – Vol. 98. – P. 216–224.

8. Bonner Weir S., Taneja M., Weir G.C.

24. Ferber S., Halkin A., Cohen H. et al.

40. Korbling M., Katz R.L., Khanna A. et al.

et al. In vitro cultivation of human islets from

Pancreatic and duodenal homeobox gene

Hepatocytes and epithelial cells of donor ori

expanded ductal tissue // Proc. Natl. Acad.

1 induces expression of insulin genes in liver

gin in recipients of peripheral blood stem cells

Sci. USA. – 2000. – Vol. 97. – P. 7999–8004.

and ameliorates streptozotocin induced

// New Engl. J. Med. – 2002. – Vol. 346. –

9. Brenner C.A., Wolny Y.M., Adler R.R.

hyperglycemia // Nat. Med. – 2000. – Vol. 6.

P. 738–746.

et al. Alternative splicing of the telomerase

– P. 568–572.

41. Krause D.S., Fackler M.J., Civin C.I.,

catalytic subunit in human oocytes and

25. Fiegel H.C., Kluth J., Lioznov M.V.

May W.S. CD34: Structure, biology, and cli

embryos // Mol. Hum. Reprod. – 1999. –

et al. Hepatic lineages isolated from develo

nical utility // Blood. – 1996. – Vol. 87. –

Vol. 5. – P. 845–850.

ping rat liver show different ways of matura

P. 1–13.

10. Broudy V.C. Stem Cell Factor and

tion // Biochem. Biophys. Res. Commun. –

42. Kubota H., Reid L.M. Clonogenic

Hematopoesis // Blood. – 1997. – Vol. 90 (4).

2003. – Vol. 305 (1). – P. 46–53.

hepatoblasts, common precursors for hepato

– P. 1345–1364.

26. Forbes S., Vig P., Poulsom R. et al.

cytic and biliary lineages, are lacking classical

11. Civin C.I., Gore S.D. Antigenic analy

Hepatic stem cells // J. path. – 2002. –

major histocompatibility complex class I anti

sis of hematopoiesis: a review // J.

Vol. 197. – P. 510–518.

gen // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2000. –

Hematother. – 1993. – Vol. 2. – P. 137–144.

27. Fox I.J., Chowdhury J.R., Kaufman S.S.

Vol. 97. – P. 12132–12137.

12. Coleman W., Grisham J. Epithelial

et al. Treatment of the Crigler–Najjar syn

43. Kuehle I., Goodell M.A. The therapeu

like stem cells of the rodent liver /

Ed.

drome type I with hepatocyte transplantation

tic potential of stem cells from adults // Biol.

A.J. Strain, A. Diehl. Liver growth and repair. –

// New Engl. J. Med. – 1998. – Vol. 338. –

Med. J. – 2002. – Vol. 325. – P. 372–376.

London: Chapman

and Hall, 1998.

–

P. 1422–1427.

44. Kurtzberg J., Wagner J.E., Laughlin M.

P. 50–99.

28. Fujio K., Evarts R.P., Hu Z. et al.

et al. Placental blood as a source of

13. Collins R.H., Anastasi J., Terstappen L.

Expression of stem cell factor and its receptor,

hematopoietic stem cells for transplantation

Brief report: Donor derived long term multili

c kit, during liver regeneration from putative

into unrelated recipients // New Engl. J. Med.

neage hematopoiesis in a liver transplant

stem cells in adult rat // Lab. Invest. – 1994. –

– 1996. – Vol. 335. – P. 157–166.

recipient // New Engl. J. Med. – 1993. – Vol.

Vol. 70 (4). – P. 511–516.

45. Laconi E. Differential Growth: From

328. – P. 762–765.

29. Gluckman E. Current status of umbili

Carcinogenesis to Liver Repopulation // Amer.

14. Crosby H.A., Hubscher S.G., Jop

cal cord blood hematopoietic stem cell trans

J. Path. – 2000. – Vol. 156. – P. 389–392.

lin R.E. et al. Immunolocalization of OV 6, a

plantation // Exp. Hematol. – 2000. – Vol. 28.

46. Lagasse E., Connors H., al Dhali

putative progenitor cell marker in human fetal

– P. 1197–1205.

my M. et al. Purified hematopoetic stem cells

and diseased pediatric liver // Hepatology. –

30. Golden Mason L., Curry M.P.,

can differentiate into hepatocytes in vivo

1998. – Vol. 28 (4). – P. 980–985.

Nolan N. et al. Differential expression of lym

// Nat. Med. – 2000. – Vol. 6 (11). –

15. Crosby H.A., Kelly D.A., Strain A.J.

phoid and myeloid markers on differentiating

P. 1212–1213.

Human hepatic stem like cells isolated using

hematopoietic stem cells in normal and tumor

47. Landsdorp P.M., Schmitt C.,

c kit or CD34 can differentiate into biliary

bearing adult human liver // Hepatology. –

Sutherland H.J. et al. Hemopoietic stem cell

epithelium // Gastroenterology. – 2001. –

2000. – Vol. 31. – P. 1251–1256.

characterization // Prog. Clin. Biol. Res. –

Vol. 120 (2). – P. 534–544.

31. Golden Mason L., O`Farrelly C.

1992. – Vol. 377. – P. 475–486.

16. Crosby H.A., Strain A.J. Adult liver

Having it all? Stem cells, haematopoiesis and

48. Laror P.F., Shields Ph., Grant A.J.,

stem cells: bone marrow, blood, or liver

lymphopoiesis in adult human liver //

Adams D.H. Recruitment of lymphocytes to the

derived? // Gut. – 2001. – Vol. 48. –

Immunol. Cell. Biology. – 2002. – Vol. 80. –

human liver // Immunol. Cell. Biol. – 2002. –

P. 153–154.

P. 45–51.

Vol. 80. – P. 52–64.

17. Dabeva M.D., Shafritz D.A.

32. Grisham J.W., Thorgeirsson S.S. Liver

49. Lemire J.M., Shiojiri N., Fausto N.

Activation, proliferation, and differentiation of

stem cells / Ed. C.S. Potten. Stem cells. –

Oval cell proliferation and the origin of small

progenitor cells into

hepatocytes in

the

London: Academic Press, 1997. – P. 233–282.

hepatocytes in liver injury induced by D galac

D galactosamine model of liver regeneration

33. Gualdi R., Bossard P., Zheng M. et al.

tosamine // Amer. J. Pathol. – 1991. –

// Amer. J. Path. – 1993. – Vol. 143. –

Hepatic specification of the gut endoderm

Vol. 139. – P. 535–552.

P. 1606–1620.

in vitro: cell signaling and transcriptional con

50. Lemmer E.R., Shepard E.G., Blakol

18. Dabeva M.D., Hwang S. G., Sriniva

trol // Genes. Dev. – 1996. – Vol. 10. –

mer K. et al. Isolation from human fetal liver of

sa R.G. et al. Differentiation of pancreatic

P. 1670–1682.

cells co expressing CD34 haematopoetic

epithelial progenitor cells into hepatocytes fol

34. Hsia C.C., Evarts R.P., Nakatsuka

stem cell and CAM 5.2 pancytokeratin mar

lowing transplantation into rat liver // Proc.

sa H. et al. Occurrence of oval type cells in

kers // J. Hepatol. – 1998. – Vol. 29 (3). –

Natl. Acad. Sci. USA. – 1997. – Vol. 94. –

hepatitis B virus associated human hepatocar

P. 450–454.

P. 7356–7361.

cinogenesis // Hepatology. – 1992. – Vol. 16

51. Lenzi R., Liu M.H., Tarsetti F. et al.

19. Danet G.H., Luongo J.L., Butler G.

(6). – P. 1327–1333.

Histogenesis of bile duct like cells proliferating

et al. C1qRp defines a new human stem cell

35. Itskovitz Eldor J., Schulding M.,

during ethionine carcinogenesis: evidence for

population with hematopoietic and hepatic

Karsenti D. et al. Differentiation of human

a biliary epithelial nature of oval cells // Lab.

potential // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. –

embryonic stem cells into embryoid bodies

Invest. – 1992. – Vol. 66. – P. 390–402.

2001. – Vol. 99 (16). – P. 10441–10445.

comprising the three embryonic germ layers

52. Levinson Dushnik M., Benvenisty N.

20. De Vos R., Desmet V. Ultrastructural

// Mol. Med. – 2000. – Vol. 6. – P. 88–95.

Involvement of hepatocyte nuclear factor 3 in

characteristics of novel epithelial cell types

36. Kakinuma S., Tanaka Y., Chinzei R.

endoderm differentiation of embryonic stem

identified in human pathologic liver specimens

et al. Human Umbilical Cord Blood as a

cells // Mol. Cell. Biol. – 1997. – Vol. 17. –

with chronic ductular reaction // Amer. J.

Source of Transplantable Hepatic Progenitor

P. 3817–3822.

Path. – 1992. – Vol. 140. – P. 1441–1450.

Cells // Stem. Cells. – 2003. – Vol. 21. –

53. Li A., Simmons P.J., Kaur P.

21. Fandrich F., Lin X., Chai G.X. et al.

P. 217–227.

Identification and isolation of candidate

Preimplantation stage stem cells induce long

37. Kawada H., Ogawa M. Bone marrow

human keratinocyte stem cells based on cell

term allogeneic graft acceptable without sup

origin of hematopoetic progenitors and stem

surface phenotype // Proc. Natl. Acad. Sci.

plementary host conditioning // Nat. Med. –

cells in murine muscle // Blood. – 2001. –

USA. – 1998. – Vol. 95. – P. 3902–3907.

2002. – Vol. 8. – P. 171–178.

Vol. 98 (7). – P. 2008–2013.

54. Li M., Pevny L., Lovell Badge R. et al.

22. Farber E. Similarities in the sequence

38. Kim N.W., Piatyszek M.A., Prowse K.R.

Generation of purified neural precursors from

of early histologic changes in the liver of rats

et al. Specific association of human telo

embryonic stem cells by lineage selection //

by ethionine, 2 acetylaminofluorene and

merase activity with immortal cells and cancer

Curr. Biol. – 1998. – Vol. 8. – P. 971–974.