Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

4 курс / Акушерство и гинекология / ОПТИМИЗАЦИЯ_ХИРУРГИЧЕСКОГО_МЕТОДА_ЛЕЧЕНИЯ_МИОМЫ_МАТКИ_В_ПРЕДГРАВИДАРНОМ

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
3.05 Mб
Скачать

81

ГЛАВА 3 ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА

ЭКСПРЕССИИ СИГНАЛЬНЫХ МОЛЕКУЛ В ЗОНЕ

ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОГО РУБЦА НА МАТКЕ

3.1Экспрессия фактора апоптоза и клеточного старения р53

взоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста

На рисунке 3.1 представлена экспрессия маркера клеточного старения р53

в зоне послеоперационного рубца в исследуемых группах после консервативной миомэктомии при изучении методом конфокальной лазерной микроскопии.

Проведённые исследования позволили установить, что во 2 группе процесс апоптоза и клеточного старения выражен больше, чем в 1 группе.

А Б Рисунок 3.1 – Экспрессия маркера р53 в исследуемых группах.

А – 1 группа. Б – 2 группа. Ядра клеток докрашивали DAPI – синяя флуоресценция, экспрессия р53 – красная флуоресценция (Alexa 647), ×200

Результаты статистической обработки изучаемого маркера

по показателю площади экспрессии в образцах из зоны послеоперационного рубца на матке после консервативной миомэктомии выявили достоверное увеличение этого показателя в 1,6 раза во 2 группе при сравнении с 1 группой (рисунок 3.2). Полученные результаты свидетельствуют о том,

что с возрастом процессы клеточного старения и апоптоза в ткани матки,

оцениваемые по экспрессии р53, становятся более интенсивными. При оценке средней яркости экспрессии р53 нами зарегистрирована тенденция

82

к повышению исследуемого показателя во 2 группе по сравнению с этим показателем у женщин в возрасте 29-35 лет (рисунок 3.3).

 

 

1,2

 

р53 в зоне

рубца, %

 

*

1

 

0,8

 

Площадь экспрессии

послеоперационного

 

0,6

 

0,4

 

0,2

 

 

 

 

 

0

 

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.2 – Сравнительная оценка площади экспрессии белка р53

в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста.

 

 

* – p 0,05 – по сравнению с 1 группой

53

 

30

 

 

 

 

яркость экспрессии р

послеоперационного рубца, у.е.

25

 

20

 

15

 

10

 

Средняя

в зоне

5

 

 

 

 

 

0

 

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.3 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии белка р53

в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

83

Приведенные в данной главе диссертационного исследования результаты были частично представлены в следующих публикациях автора:

Шаповалова, А.И. Возрастные изменения уровня экспрессии маркеров плотных контактов у женщин после миомэктомии / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Siberian Journal of Life Sciences and Agriculture. – 2021. – Т.13, № 2. – С. 32-46 [67].

Шаповалова, А.И. Возрастные особенности экспрессии маркера р53 в биоптатах интактного миометрия при миомэктомии / А.И. Шаповалова, Ю.В. Шиленкова, Р.Э. Попов // Журнал акушерства и женских болезней. – 2017. – Т.66, № S.1. – C. 167-168 [68].

Шаповалова, А.И. Экспрессия сигнальных молекул (р53, коллаген II типа, VEGF и VEGFR) в биоптатах интактного миометрия у женщин разного возраста / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Врач. – 2021. – Т.32, № 9. –

С. 76-79 [71].

3.2Экспрессия фактора апоптоза и клеточного старения р21

взоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста

Ранее было показано, что фактор транскрипции и апоптоза р21 экспрессируется при клеточном старении, характеризующемся укорочением теломер, в матке и плаценте мышей линии C57BL/6 [85]. Кроме того, установлено, что возрастное снижение синтеза эстрогена у мышей коррелирует с повышением экспрессии маркеров клеточного старения р21 и р53 в матке [125]. Однако нам не удалось обнаружить в литературе данных об экспрессии проапоптотического протеина р21 в зоне послеоперационного рубца матки у женщин.

В нашем исследовании установлено, что площадь экспрессии р21 в зоне послеоперационного рубца матки у женщин в возрасте 36-46 лет была в 2,1 раза выше по сравнению с этим показателем у женщин более молодого возраста,

29-35 лет, различие статистически значимо (рисунок 3.4). Средняя яркость экспрессии белка р21 в зоне послеоперационного рубца у женщин с возрастом имела

84

тенденцию к повышению, однако достоверного изменения этого показателя

не наблюдалось (рисунок 3.5). Полученные нами данные указывают на участие транскрипционного фактора р21 в репликативном старении клеток послеоперационного рубца матки у женщин.

 

 

1,4

*

р21 в зоне

рубца, %

1,2

 

1

 

 

 

Площадь экспрессии

послеоперационного

0,8

 

0,6

 

0,4

 

0,2

 

 

 

0

 

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.4 – Сравнительная оценка площади экспрессии белка р21

в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста.

* – p 0,05 – по сравнению с 1 группой

25

 

,

 

20

 

15

 

10

 

5

 

экспрессииСредняяяркость21р послеоперационногов зонерубца уе..

 

0

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.5 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии белка р21

в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

85

Приведенные в данной главе диссертационного исследования результаты были частично представлены в следующих публикациях автора:

Возрастные особенности экспрессии сигнальных молекул – белка р53, коллагена

II типа, VEGF и VEGFR в биоптатах интактного миометрия при миоме матки / А.И. Шаповалова, А.А. Цыпурдеева, М.И. Кахиани, Э.Н. Попов, В.О. Полякова // Молекулярная медицина. – 2019. – T.17, № 6. – С. 60-63 [14].

Шаповалова, А.И. Возрастные изменения уровня экспрессии маркеров плотных контактов у женщин после миомэктомии / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Siberian Journal of Life Sciences and Agriculture. – 2021. – Т.13, № 2. – С. 32-46 [67].

Шаповалова, А.И. Экспрессия сигнальных молекул (р53, коллаген II типа, VEGF и VEGFR) в биоптатах интактного миометрия у женщин разного возраста / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Врач. – 2021. – Т.32, № 9. –

С. 76-79 [71].

3.3Экспрессия фактора апоптоза и клеточного старения р16

взоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста

Исследование культуры клеток миомы матки человека показало, что ингибитор сигнального пути Akt предотвращает репликативное старение клеток путем снижения синтеза проапоптотического белка р16 и ассоциированных с ним факторов р21 и р53 [105]. В других исследования также была показана роль проапоптотического белка р16 в старении клеток тканей репродуктивной системы женщин, преимущественно эндометрия [77;124]. Таким образом, маркер клеточного старения и апоптоза р16 может иметь важное значение для оценки состояния тканей в зоне послеоперационного рубца на матке.

В нашем исследовании установлено, что площадь экспрессии р16 в зоне послеоперационного рубца матки у женщин в возрасте 36-46 лет была в 6,7 раза выше, чем у женщин 29-35 лет, различия статистически достоверны (рисунок 3.6).

Средняя яркость экспрессии белка р16 в зоне послеоперационного рубца

86

у женщин 2 группы была в 1,6 раза больше по сравнению с этим показателем

у женщин более молодого возраста 1 группы (рисунок 3.7). Приведенные данные позволяют заключить, что из всех исследованных маркеров клеточного старения и апоптоза (р53, р21, р16) наибольшее увеличение по показателям площади экспрессии и средней яркости экспрессии выявлено для белка р16 в зоне послеоперационного рубца матки. При этом следует отметить, что площадь экспрессии всех изучаемых проапоптотических маркеров старения повышалась в зоне послеоперационного рубца матки с увеличением возраста женщин.

 

 

3

*

 

 

 

р16 в зоне

рубца, %

2,5

 

2

 

Площадь экспрессии

послеоперационного

 

1,5

 

1

 

 

 

 

 

0,5

 

 

 

0

 

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.6 – Сравнительная оценка площади экспрессии белка р16

взоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста

*– p 0,05 – по сравнению с 1 группой

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

 

 

87

 

 

 

30

*

в ,

 

 

 

 

 

Средняя яркость экспрессии р16 зоне послеоперационного рубца

 

25

 

 

20

 

у.е.

15

 

10

 

5

 

 

 

 

 

0

 

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.7 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии белка р16

взоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста

*– p 0,05 – по сравнению с 1 группой

Приведенные в данной главе диссертационного исследования результаты были частично представлены в следующих публикациях автора:

Шаповалова, А.И. Возрастные изменения уровня экспрессии маркеров плотных контактов у женщин после миомэктомии / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Siberian Journal of Life Sciences and Agriculture. – 2021. – Т.13, № 2. – С. 32-46 [67].

Шаповалова, А.И. Экспрессия сигнальных молекул (р53, коллаген II типа, VEGF и VEGFR) в биоптатах интактного миометрия у женщин разного возраста / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Врач. – 2021. – Т.32, № 9. –

С. 76-79 [71].

3.4 Экспрессия фактора роста эндотелия сосудов VEGF и его рецептора

VEGFR в зоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста

Оценка экспрессии фактора роста эндотелия сосудов VEGF и его рецептора

VEGFR в зоне послеоперационного рубца имеет важное диагностическое

88

значение. Процессы ангиогенеза неразрывно связаны с формированием состоятельного послеоперационного рубца на матке после консервативной миомэктомии. Это свидетельствует о том, что с возрастом апоптотические процессы активизируются, но только в части рубца, и занимают большую площадь по сравнению с тем, что характерно для исследования материала,

полученного от женщин у 1 группы. Показатели средней яркости экспрессии

VEGF и его рецептора VEGFR также носят не локальный характер распределения,

а верифицируются по всему препарату.

На микрофотографиях (рисунки 3.8 и 3.9) представлены результаты иммуногистохимического исследования экспрессии VEGF и VEGFR в зоне послеоперационного рубца на матке после консервативной миомэктомии в исследуемых группах.

А Б Рисунок 3.8 – Экспрессия VEGF в исследуемых группах

А – 1 группа, Б – 2 группа. Ядра клеток докрашивали DAPI – синяя флуоресценция, экспрессия VEGF – красная флуоресценция (Alexa 647), ×200

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

89

А Б Рисунок 3.9 – Экспрессия VEGFR в исследуемых группах.

А – 1 группа, Б – 2 группа. Ядра клеток докрашивали DAPI – синяя флуоресценция, экспрессия VEGFR – красная флуоресценция (Alexa 647), ×200

По данным литературы известно, что факторы неоангиогенеза являются регуляторами репарации тканей В зависимости от структуры и рецепторной

специфичности они могут также способствовать активации воспалительного

процесса

и рубцеванию ткани. Результаты

морфометрического

анализа

VEGF

и VEGFR показали достоверное снижение площади экспрессии этих молекул

соответственно в 1,5

и 5,1 раза

в ткани

послеоперационных

рубцов

матки

у женщин

в возрасте

36-46 лет

при сопоставлении с пациентками младшей

возрастной группы (рисунки 3.10 и 3.12). Средняя яркость экспрессии VEGF

и VEGFR

в образцах

послеоперационных

рубцов миометрия

снижалась при

увеличении возраста пациенток соответственно в 2,8 и 4,3 и раза (рисунки 3.11 и

3.13).

Полученные данные подтверждают результаты других исследований,

свидетельствующие о том, что в более молодом возрасте неоангиогенез в матке происходит более выражено и в 1,4 раза снижается после 36 лет. В ходе наших исследований было выявлено статистически значимое снижение экспрессии

VEGF и VEGFR в послеоперационных рубцах матки с возрастом. Это может свидетельствовать о том, что в зоне рубца наблюдается постоянное образование сосудистого русла, что позволяет оценить рубец как структуру, которая

90

снабжается кровью. Полученные данные позволяют сделать прогноз о том, как будет протекать беременность у женщин с рубцом на матке.

 

18

 

Площадьэкспресии VEGF в зоне

16

 

14

 

12

*

10

 

8

 

6

 

4

 

2

 

%рубцапослеоперационного,

 

 

0

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.10 – Сравнительная оценка площади экспрессии VEGF

в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста

 

 

* – p 0,05 – по сравнению с 1 группой

 

 

35

 

Средняяяркость экспрессии

VEGFв зоне послеоперационного

30

 

25

 

20

 

15

*

 

10

 

5

 

рубцауе.,.

 

 

 

0

 

 

 

1 группа (29-35 лет)

2 группа (36-46 лет)

Рисунок 3.11 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии VEGF

взоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста

*– p 0,05 – по сравнению с 1 группой

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/