4 курс / Акушерство и гинекология / ОПТИМИЗАЦИЯ_ХИРУРГИЧЕСКОГО_МЕТОДА_ЛЕЧЕНИЯ_МИОМЫ_МАТКИ_В_ПРЕДГРАВИДАРНОМ
.pdf81
ГЛАВА 3 ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА
ЭКСПРЕССИИ СИГНАЛЬНЫХ МОЛЕКУЛ В ЗОНЕ
ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОГО РУБЦА НА МАТКЕ
3.1Экспрессия фактора апоптоза и клеточного старения р53
взоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста
На рисунке 3.1 представлена экспрессия маркера клеточного старения р53
в зоне послеоперационного рубца в исследуемых группах после консервативной миомэктомии при изучении методом конфокальной лазерной микроскопии.
Проведённые исследования позволили установить, что во 2 группе процесс апоптоза и клеточного старения выражен больше, чем в 1 группе.
А Б Рисунок 3.1 – Экспрессия маркера р53 в исследуемых группах.
А – 1 группа. Б – 2 группа. Ядра клеток докрашивали DAPI – синяя флуоресценция, экспрессия р53 – красная флуоресценция (Alexa 647), ×200
Результаты статистической обработки изучаемого маркера
по показателю площади экспрессии в образцах из зоны послеоперационного рубца на матке после консервативной миомэктомии выявили достоверное увеличение этого показателя в 1,6 раза во 2 группе при сравнении с 1 группой (рисунок 3.2). Полученные результаты свидетельствуют о том,
что с возрастом процессы клеточного старения и апоптоза в ткани матки,
оцениваемые по экспрессии р53, становятся более интенсивными. При оценке средней яркости экспрессии р53 нами зарегистрирована тенденция
82
к повышению исследуемого показателя во 2 группе по сравнению с этим показателем у женщин в возрасте 29-35 лет (рисунок 3.3).
|
|
1,2 |
|
р53 в зоне |
рубца, % |
|
* |
1 |
|
||
0,8 |
|
||
Площадь экспрессии |
послеоперационного |
|
|
0,6 |
|
||
0,4 |
|
||
0,2 |
|
||
|
|
||
|
|
0 |
|
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.2 – Сравнительная оценка площади экспрессии белка р53 |
|||
в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста. |
|||
|
|
* – p 0,05 – по сравнению с 1 группой |
|
53 |
|
30 |
|
|
|
|
|
яркость экспрессии р |
послеоперационного рубца, у.е. |
25 |
|
20 |
|
||
15 |
|
||
10 |
|
||
Средняя |
в зоне |
5 |
|
|
|
||
|
|
0 |
|
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.3 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии белка р53 |
|||
в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста |
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
83
Приведенные в данной главе диссертационного исследования результаты были частично представлены в следующих публикациях автора:
Шаповалова, А.И. Возрастные изменения уровня экспрессии маркеров плотных контактов у женщин после миомэктомии / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Siberian Journal of Life Sciences and Agriculture. – 2021. – Т.13, № 2. – С. 32-46 [67].
Шаповалова, А.И. Возрастные особенности экспрессии маркера р53 в биоптатах интактного миометрия при миомэктомии / А.И. Шаповалова, Ю.В. Шиленкова, Р.Э. Попов // Журнал акушерства и женских болезней. – 2017. – Т.66, № S.1. – C. 167-168 [68].
Шаповалова, А.И. Экспрессия сигнальных молекул (р53, коллаген II типа, VEGF и VEGFR) в биоптатах интактного миометрия у женщин разного возраста / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Врач. – 2021. – Т.32, № 9. –
С. 76-79 [71].
3.2Экспрессия фактора апоптоза и клеточного старения р21
взоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста
Ранее было показано, что фактор транскрипции и апоптоза р21 экспрессируется при клеточном старении, характеризующемся укорочением теломер, в матке и плаценте мышей линии C57BL/6 [85]. Кроме того, установлено, что возрастное снижение синтеза эстрогена у мышей коррелирует с повышением экспрессии маркеров клеточного старения р21 и р53 в матке [125]. Однако нам не удалось обнаружить в литературе данных об экспрессии проапоптотического протеина р21 в зоне послеоперационного рубца матки у женщин.
В нашем исследовании установлено, что площадь экспрессии р21 в зоне послеоперационного рубца матки у женщин в возрасте 36-46 лет была в 2,1 раза выше по сравнению с этим показателем у женщин более молодого возраста,
29-35 лет, различие статистически значимо (рисунок 3.4). Средняя яркость экспрессии белка р21 в зоне послеоперационного рубца у женщин с возрастом имела
84
тенденцию к повышению, однако достоверного изменения этого показателя
не наблюдалось (рисунок 3.5). Полученные нами данные указывают на участие транскрипционного фактора р21 в репликативном старении клеток послеоперационного рубца матки у женщин.
|
|
1,4 |
* |
р21 в зоне |
рубца, % |
1,2 |
|
1 |
|
||
|
|
||
Площадь экспрессии |
послеоперационного |
0,8 |
|
0,6 |
|
||
0,4 |
|
||
0,2 |
|
||
|
|
0 |
|
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.4 – Сравнительная оценка площади экспрессии белка р21 |
|
в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста. |
|
* – p 0,05 – по сравнению с 1 группой |
|
25 |
|
, |
|
20 |
|
15 |
|
10 |
|
5 |
|
экспрессииСредняяяркость21р послеоперационногов зонерубца уе.. |
|
0 |
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.5 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии белка р21 |
|
в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста |
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
85
Приведенные в данной главе диссертационного исследования результаты были частично представлены в следующих публикациях автора:
Возрастные особенности экспрессии сигнальных молекул – белка р53, коллагена
II типа, VEGF и VEGFR в биоптатах интактного миометрия при миоме матки / А.И. Шаповалова, А.А. Цыпурдеева, М.И. Кахиани, Э.Н. Попов, В.О. Полякова // Молекулярная медицина. – 2019. – T.17, № 6. – С. 60-63 [14].
Шаповалова, А.И. Возрастные изменения уровня экспрессии маркеров плотных контактов у женщин после миомэктомии / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Siberian Journal of Life Sciences and Agriculture. – 2021. – Т.13, № 2. – С. 32-46 [67].
Шаповалова, А.И. Экспрессия сигнальных молекул (р53, коллаген II типа, VEGF и VEGFR) в биоптатах интактного миометрия у женщин разного возраста / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Врач. – 2021. – Т.32, № 9. –
С. 76-79 [71].
3.3Экспрессия фактора апоптоза и клеточного старения р16
взоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста
Исследование культуры клеток миомы матки человека показало, что ингибитор сигнального пути Akt предотвращает репликативное старение клеток путем снижения синтеза проапоптотического белка р16 и ассоциированных с ним факторов р21 и р53 [105]. В других исследования также была показана роль проапоптотического белка р16 в старении клеток тканей репродуктивной системы женщин, преимущественно эндометрия [77;124]. Таким образом, маркер клеточного старения и апоптоза р16 может иметь важное значение для оценки состояния тканей в зоне послеоперационного рубца на матке.
В нашем исследовании установлено, что площадь экспрессии р16 в зоне послеоперационного рубца матки у женщин в возрасте 36-46 лет была в 6,7 раза выше, чем у женщин 29-35 лет, различия статистически достоверны (рисунок 3.6).
Средняя яркость экспрессии белка р16 в зоне послеоперационного рубца
86
у женщин 2 группы была в 1,6 раза больше по сравнению с этим показателем
у женщин более молодого возраста 1 группы (рисунок 3.7). Приведенные данные позволяют заключить, что из всех исследованных маркеров клеточного старения и апоптоза (р53, р21, р16) наибольшее увеличение по показателям площади экспрессии и средней яркости экспрессии выявлено для белка р16 в зоне послеоперационного рубца матки. При этом следует отметить, что площадь экспрессии всех изучаемых проапоптотических маркеров старения повышалась в зоне послеоперационного рубца матки с увеличением возраста женщин.
|
|
3 |
* |
|
|
|
|
р16 в зоне |
рубца, % |
2,5 |
|
2 |
|
||
Площадь экспрессии |
послеоперационного |
|
|
1,5 |
|
||
1 |
|
||
|
|
||
|
|
0,5 |
|
|
|
0 |
|
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.6 – Сравнительная оценка площади экспрессии белка р16
взоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста
*– p 0,05 – по сравнению с 1 группой
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
|
|
87 |
|
|
|
30 |
* |
в , |
|
|
|
|
|
|
|
Средняя яркость экспрессии р16 зоне послеоперационного рубца |
|
25 |
|
|
20 |
|
|
у.е. |
15 |
|
|
10 |
|
||
5 |
|
||
|
|
||
|
|
0 |
|
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.7 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии белка р16
взоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста
*– p 0,05 – по сравнению с 1 группой
Приведенные в данной главе диссертационного исследования результаты были частично представлены в следующих публикациях автора:
Шаповалова, А.И. Возрастные изменения уровня экспрессии маркеров плотных контактов у женщин после миомэктомии / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Siberian Journal of Life Sciences and Agriculture. – 2021. – Т.13, № 2. – С. 32-46 [67].
Шаповалова, А.И. Экспрессия сигнальных молекул (р53, коллаген II типа, VEGF и VEGFR) в биоптатах интактного миометрия у женщин разного возраста / А.И. Шаповалова, В.О. Полякова, Т.С. Клейменова // Врач. – 2021. – Т.32, № 9. –
С. 76-79 [71].
3.4 Экспрессия фактора роста эндотелия сосудов VEGF и его рецептора
VEGFR в зоне послеоперационного рубца на матке у женщин разного возраста
Оценка экспрессии фактора роста эндотелия сосудов VEGF и его рецептора
VEGFR в зоне послеоперационного рубца имеет важное диагностическое
88
значение. Процессы ангиогенеза неразрывно связаны с формированием состоятельного послеоперационного рубца на матке после консервативной миомэктомии. Это свидетельствует о том, что с возрастом апоптотические процессы активизируются, но только в части рубца, и занимают большую площадь по сравнению с тем, что характерно для исследования материала,
полученного от женщин у 1 группы. Показатели средней яркости экспрессии
VEGF и его рецептора VEGFR также носят не локальный характер распределения,
а верифицируются по всему препарату.
На микрофотографиях (рисунки 3.8 и 3.9) представлены результаты иммуногистохимического исследования экспрессии VEGF и VEGFR в зоне послеоперационного рубца на матке после консервативной миомэктомии в исследуемых группах.
А Б Рисунок 3.8 – Экспрессия VEGF в исследуемых группах
А – 1 группа, Б – 2 группа. Ядра клеток докрашивали DAPI – синяя флуоресценция, экспрессия VEGF – красная флуоресценция (Alexa 647), ×200
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
89
А Б Рисунок 3.9 – Экспрессия VEGFR в исследуемых группах.
А – 1 группа, Б – 2 группа. Ядра клеток докрашивали DAPI – синяя флуоресценция, экспрессия VEGFR – красная флуоресценция (Alexa 647), ×200
По данным литературы известно, что факторы неоангиогенеза являются регуляторами репарации тканей В зависимости от структуры и рецепторной
специфичности они могут также способствовать активации воспалительного
процесса |
и рубцеванию ткани. Результаты |
морфометрического |
анализа |
VEGF |
||
и VEGFR показали достоверное снижение площади экспрессии этих молекул |
||||||
соответственно в 1,5 |
и 5,1 раза |
в ткани |
послеоперационных |
рубцов |
матки |
|
у женщин |
в возрасте |
36-46 лет |
при сопоставлении с пациентками младшей |
|||
возрастной группы (рисунки 3.10 и 3.12). Средняя яркость экспрессии VEGF |
||||||
и VEGFR |
в образцах |
послеоперационных |
рубцов миометрия |
снижалась при |
увеличении возраста пациенток соответственно в 2,8 и 4,3 и раза (рисунки 3.11 и
3.13).
Полученные данные подтверждают результаты других исследований,
свидетельствующие о том, что в более молодом возрасте неоангиогенез в матке происходит более выражено и в 1,4 раза снижается после 36 лет. В ходе наших исследований было выявлено статистически значимое снижение экспрессии
VEGF и VEGFR в послеоперационных рубцах матки с возрастом. Это может свидетельствовать о том, что в зоне рубца наблюдается постоянное образование сосудистого русла, что позволяет оценить рубец как структуру, которая
90
снабжается кровью. Полученные данные позволяют сделать прогноз о том, как будет протекать беременность у женщин с рубцом на матке.
|
18 |
|
Площадьэкспресии VEGF в зоне |
16 |
|
14 |
|
|
12 |
* |
|
10 |
|
|
8 |
|
|
6 |
|
|
4 |
|
|
2 |
|
|
%рубцапослеоперационного, |
|
|
|
0 |
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.10 – Сравнительная оценка площади экспрессии VEGF |
|||
в зоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста |
|||
|
|
* – p 0,05 – по сравнению с 1 группой |
|
|
|
35 |
|
Средняяяркость экспрессии |
VEGFв зоне послеоперационного |
30 |
|
25 |
|
||
20 |
|
||
15 |
* |
||
|
|||
10 |
|
||
5 |
|
||
рубцауе.,. |
|
||
|
|
0 |
|
|
|
1 группа (29-35 лет) |
2 группа (36-46 лет) |
Рисунок 3.11 – Сравнительная оценка средней яркости экспрессии VEGF
взоне послеоперационного рубца у женщин разного возраста
*– p 0,05 – по сравнению с 1 группой
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/