Методы окрашивания в микробиологии
.pdf
МЕТОДЫ ОКРАШИВАНИЯ
В МИКРОБИОЛОГИИ
СПОСОБЫ ОКРАСКИ
НЕГАТИВНЫЕ 
ПОЗИТИВНЫЕ
окрашивается фон |
окрашиваются |
мазка, на котором |
микроорганизмы, |
хорошо видны |
которые хорошо |
неокрашенные |
виды на |
микроорганизмы |
неокрашенном фоне |
*окрашивание капсул |
*окрашивание холерного |
|||
бактерий по Бурри Гинсу |
вибриона по Граму |
|||
|
ПО КОЛИЧЕСТВУ КРАСИТЕЛЕЙ |
|||
|
ПРОСТЫЕ |
|
СЛОЖНЫЕ |
|
используется краситель |
используются и |
|||
|
малоинформативен |
более красителей |
||
|
ПО НАЗНАЧЕНИЮ |
|||
|
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНО |
|
СПЕЦИАЛЬНЫЕ |
|
|
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ |
Окраска |
||
• |
Метод Грама |
• |
Спор |
|
• |
Капсул |
|||
• |
Метод Циля Нильсена |
|||
• |
Жгутиков |
|||
|
|
|||
|
|
• |
Включений |
|
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ БАКТЕРИЙ
при использовании этих методов окраски последовательно применяют красители контрастного цвета и обесцвечивающие (дифференцирующие) вещества (спирт или кислоту)
Методика окраски по Граму
Фиксируем мазок накладываем на него полоску фильтровальной бумаги
Наносим |
капли раствора генцианового |
фиолетового выдерживаем 
мин
Снимаем бумагу наносим раствор Люголя
выдерживаем мин
Сливаем раствор Люголя мазок обесцвечиваем
этиловым спиртом выдерживаем |
сек |
Промываем мазок водой
Наносим на мазок водный раствор фуксина на 
мин
Промываем мазок водой высушиваем
генцианвиолет |
р р Люголя |
спирт |
фуксин |
Грам+ Грам-
По методике грама бактерии делятся на грам и грам
в основе дифференциации лежит отличие в строении клеточной стенки
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ БАКТЕРИЙ
Методика окраски по Цилю Нильсену
Применяют для окрашивания кислотоустойчивых бактерий
возбудителей туберкулеза (Mycobacterium
tuberculosis) и лепры (Mycobacterium leprae) за счет наличия миколовых кислот
Фиксируем мазок накладываем на него полоску фильтровальной бумаги
Наливаем на мазок карболовый р р фуксина
Циля предметное стекло подогреваем над
пламенем горелки до появления паров
Снова наливаем р р проделываем манипуляцию раза
Снимаем бумагу пинцетом промываем мазок водой
Обесцвечиваем |
р м |
выдерживаем |
|
|
мин |
Промываем водой
Наносим метиленовый синий выдерживаем 
мин
Промываем водой микроскопируем
Некислотоустойчивые
бактерии
Кислотоустойчивые
бактерии
СПЕЦИАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ БАКТЕРИЙ
ОКРАСКА КАПСУЛЫ Методика окраски по Бурии Гинсу
•Используют для окрашивания чистой культуры выращенной на питательной среде
•В препарате видны бактерии красного цвета вокруг которых контрастно выделяются неокрашенные капсулы на коричнево черном фоне
ОКРАСКА ЖГУТИКОВ Методика окраски по Леффлеру
•Видны крупные красные палочки
окруженные длинными жгутиками розового цвета
ОКРАСКА СПОР Методика окраски по Ауески
•Споры окрашиваются в красный цвет
цитоплазма вегетативных форм бактерий в синий
ОКРАСКА ЗЕРЕН ВОЛЮТИНА Методика окраски по Нейссеру
•Зерна волютина окрашиваются в темно
синий цвет цитоплазма клеток в желтый или светло коричневый цвет