диссертации / 133

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

«РОССИЙСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.И. ПИРОГОВА» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

На правах рукописи

ЯКОВЛЕВА АНАСТАСИЯ АЛЕКСЕЕВНА

АКТИВНОСТЬ ДИПЕПТИДИЛПЕПТИДАЗЫ-4 В СЫВОРОТКЕ

КРОВИ ЗДОРОВЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ, ИХ МАТЕРЕЙ И ДЕТЕЙ С

ЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ИШЕМИЕЙ

14.01.08. – ПЕДИАТРИЯ

ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Михеева Инна Григорьевна

Москва, 2015

2

ОГЛАВЛЕНИЕ

4.2. Активность ДПП-4 в сыворотке крови здоровых новорожденных детей 3-

5.7. Взаимосвязь активности ДПП-4 в сыворотке крови новорожденных детей

4

5

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования

Одним из актуальных вопросов неонатологии является гипоксически-

ишемическое поражение мозга плода и новорожденного, оно занимает ведущее место в структуре перинатальной заболеваемости [6, 22, 34, 44]. Согласно исследованиям последних лет частота данной патологии у доношенных новорожденных детей колеблется от 15 до 30%, а у недоношенных детей составляет около 40% [6, 13, 14, 165]. Гипоксическое повреждение ЦНС приводит к запуску иммунопатологических процессов и дизрегуляции в системе нейропептидов [21, 22, 36], которые являются универсальными эндогенными биорегуляторами клеточных функций. На уровень регуляторных нейропептидов существенное влияние оказывают ферменты, их гидролизующие. Поэтому в научном и практическом плане представляет интерес изучение активности ферментов деградации регуляторных пептидов у детей с гипоксически-ишемическим поражением ЦНС.

Одним из таких ферментов является дипептидилпептидаза-4 (ДПП-4),

мембраносвязанная сериновая протеаза, широко представленная в организме человека. ДПП-4 обнаружена в тканях кишечника, печени, легких, сердца,

селезенки, почек, яичников. ДПП-4 представлена на иммунокомпетентных клетках – фермент является кластером дифференцировки CD26 Т-лимфоцитов.

По данным литературы ДПП-4 и ДПП-4-подобные пептидазы гидролизуют целый ряд хемо- и цитокинов, нейропептидов и пептидных гормонов, таких как субстанция Р, нейропептид Y, пептид YY, энтеростатин, глюкозо-зависимый инсулинотропный полипептид (GIP) и глюкагоноподобный пептид-1(GLP-1) [45, 104, 112]. ДПП-4 принимает участие в поддержании гомеостаза глюкозы.

Предполагается, что ДПП-4 вовлечена в нейродегенеративные процессы, в том числе гипоксически-ишемического генеза, однако изучение активности ДПП-4

при церебральной ишемии в педиатрической практике до сих пор не

6

проводилось. Единственная зарубежная работа P.Rohnert et al. (2012)

установила участие этой пептидазы в процессах воспаления и нейродегенерации при ишемическом поражении ЦНС у экспериментальных животных. Учитывая многофункциональную физиологическую роль фермента,

представляет несомненный научный и практический интерес исследование активности ДПП-4 у новорожденных разного срока гестации в интранатальный и неонатальный периоды при гипоксическом поражении ЦНС.

Цель и задачи исследования

Целью данной работы явилось изучение активности дипептидилпептидазы-4 в сыворотке крови здоровых новорожденных, их матерей, доношенных и недоношенных новорожденных детей с церебральной ишемией I-II степени.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1.Определить активность ДПП-4 в сыворотке крови здоровых рожениц,

родильниц и пуповинной крови их здоровых новорожденных детей при физиологическом течении родов и раннего неонатального периода.

2. Исследовать активность ДПП-4 в сыворотке крови доношенных и недоношенных детей 32-36 недель гестации с церебральной ишемией I-II

степени с задержкой и без задержки внутриутробного развития.

3.Изучить взаимосвязь активности ДПП-4 в сыворотке крови с состоянием ЦНС у доношенных и недоношенных детей 32-36 недель гестации с церебральной ишемией I-II степени.

4.Исследовать активность ДПП-4 в сыворотке крови доношенных и недоношенных детей 32-36 недель гестации с церебральной ишемией I-II

степени в динамике после нормализации неврологической симптоматики.

Научная новизна работы

Впервые показано, что активность ДПП-4 в сыворотке крови матерей при физиологическом течении беременности и родов достоверно выше (р<0,001),

чем у здоровых небеременных женщин того же возраста, и повышается по мере

7

приближения родов. Активность ДПП-4 в пуповинной крови здоровых новорожденных детей достоверно ниже (р<0,05) и не коррелирует с активностью этого фермента в крови их матерей в период родов. Это свидетельствует о том, что данная ферментная система плода в период родов функционирует автономно от матери.

В раннем неонатальном периоде активность ДПП-4 в сыворотке крови доношенных и недоношенных детей 32-36 недель гестации с церебральной ишемией (ЦИ) I-II степени достоверно выше (р<0,001), чем у здоровых новорожденных.

Установлено влияние задержки внутриутробного развития (ЗВУР) на активность ДПП-4 у доношенных детей с ЦИ I-II степени. При сочетании ЦИ со ЗВУР активность фермента ниже (р<0,05), чем у доношенных детей с ЦИ без ЗВУР. В группе недоношенных детей данная закономерность не прослеживается.

Выявлена взаимосвязь активности ДПП-4 сыворотки крови доношенных новорожденных с состоянием ЦНС: у новорожденных с синдромом возбуждения она выше (р<0,05), чем у детей с синдромом угнетения, у детей с синдромом угнетения с элементами возбуждения значения активности занимают промежуточное положение.

Показано сохранение высокой активности ДПП-4 (р<0,05) в сыворотке крови доношенных детей и недоношенных детей с ЦИ I-II степени на фоне нормализации неврологической симптоматики в результате проводимой терапии, что свидетельствует о сохраняющемся иммунопатологическом процессе.

Практическая значимость

Определены и предложены нормативные показатели активности ДПП-4 в

сыворотке крови здоровых новорожденных детей и их матерей при физиологическом течении беременности и родов.

8

Рекомендовано определение активности ДПП-4 в сыворотке крови у новорожденных детей в качестве биохимического маркера ЦИ I-II степени.

Доказана диагностическая значимость определения уровня активности ДПП-4 в сыворотке крови у доношенных детей с ЦИ I-II степени для дифференциальной диагностики синдромов угнетения и возбуждения ЦНС.

У новорожденных с ЦИ I-II степени показано исследование активности ДПП-4 в сыворотке крови при нормализации неврологической симптоматики для объективной оценки иммунопатологического процесса.

Основные положения, выносимые на защиту

1.Активность ДПП-4 в сыворотке крови здоровых матерей повышается в результате стресса, связанного с родоразрешением. Этот фермент в пуповинной крови здоровых новорожденных детей проявляет более низкую активность, чем у их матерей и функционирует автономно от матери.

2.В раннем неонатальном периоде церебральная ишемия I-II степени сопровождается значительным повышением активности ДПП-4 в сыворотке крови доношенных и недоношенных детей 32-36 недель гестации. Активность фермента не снижается при нормализации неврологической симптоматики.

3.У доношенных детей с церебральной ишемией I-II степени активность ДПП-4 зависит от состояния ЦНС: у новорожденных с синдромом возбуждения она выше, чем у детей с синдромом угнетения.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в практику работы филиала №2 ГБУЗ Морозовская ДГКБ ДЗМ, родильного дома ГБУЗ ГКБ №57 ДЗМ, ФГБУ Научного центра психического здоровья РАМН. Материалы диссертации используются при обучении студентов, клинических ординаторов, интернов, врачей факультета повышения квалификации.

9

Апробация работы

Работа апробирована на совместной конференции сотрудников кафедры пропедевтики детских болезней ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова, филиала №2 ГБУЗ Морозовская ДГКБ ДЗМ, ФГБУ Научного центра психического здоровья РАМН и ФГБУ НИИ Фармакологии им. В.В. Закусова РАМН - 2 июля 2014 г.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них 3 в журналах, рекомендованных к изданию ВАК.

Структура и объём диссертации

Диссертация изложена на 115 страницах машинописного текста, содержит введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, клинико-анамнестическую характеристику обследованных детей и их матерей, изложение результатов и их обсуждение, выводы, практические рекомендации и список литературы, включающий 44 отечественных и 127

зарубежных источников. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 9 рисунками.

10

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ДИПЕПТИДИЛПЕПТИДАЗЫ-4,

СВЯЗЬ С ЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ИШЕМИЕЙ

1.1Церебральная ишемия у новорожденных детей

1.1.1.Эпидемиология

Внастоящее время гипоксия рассматривается, как основной

патогенетический фактор повреждения мозга плода и новорожденного [22].

Поэтому проблема перинатальных гипоксических поражений головного мозга является чрезвычайно актуальной и находится в центре внимания научных исследований [6, 34, 44]. Значимость изучения данной патологии обусловлена прогрессирующим ростом частоты церебральных нарушений у новорожденных, ведущей их ролью в формировании инвалидности с детства,

влиянием на последующее нервно-психическое и соматическое развитие детей,

сохраняющимися трудностями в диагностике и терапии данного заболевания

[3, 4, 15, 17, 37, 42].

Основные структурно-функциональные нарушения головного мозга возникают не только в период действия гипоксии, но и в последующем. Это приводит к развитию тяжёлых заболеваний, таких как детский церебральный паралич, симптоматические формы эпилепсии, органические формы слабоумия,

нарушения формирования речи и др. [4, 6, 32, 34]. В структуре ранней детской инвалидности перинатальные поражения нервной системы составляют 60-70% [13].

Гипоксические повреждения головного мозга занимают одно из первых мест среди перинатальных повреждений нервной системы и являются основными причинами перинатальной смертности, составляя от 20 до 50% в ее структуре [7, 8, 21, 22].

По данным ВОЗ, частота нервно-психических заболеваний среди детей составляет около 10%, из них 70-80% связаны с перинатальными поражениями