Изучение кариотипа животных (80
..pdfпод микроскопом довольно трудоемкая задача, длину хромосом можно измерить по микрофотографии.
2.Относительная длина хромосомы (Lr) ,в % :
Lr = длина изучаемой хромосомы |
* 100 |
|
длина |
всех хромосом кариотипа |
|
3.Плечевой индекс (J b):
Jb = длина длинного плеча хромосомы длина короткого плеча хромосомы
4.Центромерный индекс (Je),в %:
Je = длина короткого плеча хромосомы * 100 длина всей хромосомы
Методика измерения объектов по микрофотографии
Необходимо определить абсолютную длину одной хромосомы (маркерная хромосома) под микроскопомс помощью окуляр- и объектмикрометра в мкм. Измерить длину этой же хромосомы на микрофотографии. Зная истинную длину хромосомы и ее размеры на микрофотографии можно определить коэффициент увеличения всех объектов на фото.
Например, истинная длина хромосомы 4,8 мкм, длина ее на микрофотографии – 9,6 мм, следовательно, коэффициент увеличения (К0) равен:
К0 = 9,6 * 1000 : 4,8 = 2000 раз Рассчитав коэффициент можно определить истинные размеры
каждой хромосомы:
La = длина на микрофотографии в мкм : К0
9
A
C
Д
В
Рис.5. Кариограмма хряка.
Идентификация кариотипа свиньи
Диплоидный набор хромосом у домашних свиней составляет 38 хромосом (19 пар). В кариотипе выделяют 4 группы хромосом (А, B,
С, Д).
I.К группе А относятся три пары крупных субметацентрических
хромосом с плечами неравной длины.
II.К группе В относятся все акроцентрические хромосомы. Их
шесть пар.
III. К группе С относят 6 пар субметацентрических хромосом среднего размера. Они примерно одинаковы по длине.
IV. К группе Д относят 4 пары. Это метацентрические хромосомы с плечами равной длины.
10
XIX пара – половые хромосомы
X – хромосома самая крупная из метацентриков; Y – хромосома самая маленькая.
Цель занятия: изучить структуру хромосом и особенности кариотипа животных.
Материал и оборудование: микроскопы, цитологические препараты, культуры лейкоцитов свиньи, микрофотографии кариотипа свиньи, ножницы, клей.
Порядок выполнения задания
1.Пользуясь прилагаемой кариограммой (рис.5) определить, к какой группе и паре гомологичных хромосом относится каждая из них. Вырезать все хромосомы из метафазной пластинки и вклеить их в тетрадь. Центромеры всех хромосом должны быть на одной линии, короткое плечо хромосомы выше линии.
2.Измерить длину каждой хромосомы миллиметровкой, определить длину каждого плеча и данные занести в таблицу №1.
Таблица 1. Параметры хромосом свиньи
Номера пар |
|
Длина в мкм |
|
|
хромосом в |
всей |
|
короткого |
|
соответствии с |
длинного плеча |
|||
хромосомы |
плеча |
|||
кариограммой |
|
|||
|
|
|
||
1 |
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
. |
|
|
|
|
. |
|
|
|
|
X |
|
|
|
|
Y |
|
|
|
11
3.Рассчитать увеличение на фотографии для определения истинных (абсолютных) размеров хромосом (La). Маркерная хромосома в кариотипе свиньи:
I-я пара – 3,2 мкм; длинное плечо – 2,4 мкм; короткое плечо – 0,8 мкм.
4.Определить абсолютную длину каждой хромосомы (La) в мкм, рассчитать относительную длину (Lr), плечевой индекс (Jb) и центромерный индекс (Je). Результаты занести в таблицу №2.
Таблица №2. Морфометрические параметры хромосом свиньи
Номер пары |
|
Параметры |
|
|
хромосом на |
Абсолютна |
Относительная |
Плечевой |
Центромерн |
микрофотогр |
я длина |
длина (Lr), мкм |
индекс(Jb) |
ый индекс |
афии |
(La), мкм |
|
|
(Je) |
1
2
3
.
.
X Y
5.Дать характеристику кариотипа, указать типы хромосом и их размеры.
Вопросы для самостоятельной подготовки
1.Культивирование лейкоцитов крови крупного рогатого скота.
2.Сравнительный анализ методов окрашивания хромосом.
3.Типы хромосомных мутаций и их влияние на продуктивность и жизнеспособность животных.
12
Литература
1.Бакай А.В., Кочиш И.И., Скрипниченко Г.Г. Генетика. – М.:
КолосС, 2007. – 448 с.: ил.
2.Гофман-Кадошников П.Б., Ларцева С.Х. Руководство к практическим занятиям по генетике. - М.: Колос, 1975.- 224 с., ил.
3.Карманова Е.П., Болгов А.Е. Практикум по генетике. - Петрозаводск: ПКГУ, 2004. -204 с.
4.Ларцева С.Х., Муксинов М.К. Практикум по генетике. – М.: Агропромиздат, 1985. – 288с., ил.
5.Яковлев А.Ф. Цитогенетическая оценка племенных животных.
– М.: Агропромиздат, 1985.
13