Методы иммунодиагностики

Преимущества аллергодиагностики методом ИФА:
• Высокие чувствительность и специфичность
• Экономическая доступность
• Простота эксперимента
• Использование универсального оборудования
• Получение достоверных воспроизводимых результатов
• Возможность автоматизации всех этапах анализа

В основе возникновения и развития аутоиммунных заболеваний лежит единый механизм – образование клонов Т и В лимфоцитов, а также иммуноглобулинов, действующих против собственных интактных антигенных структур. Поскольку аутоантиген является постоянным продуктом собственного генетического материала организма, его зачастую невозможно удалить из организма, что приводит к хроническому характеру аутоиммунных процессов. Помимо клинических проявлений аутоиммунного процесса, которые связанны с реализацией иммунной реакции на аутоантиген, важную роль играют и нарушения в работе повреждаемого органа или ткани, клинические проявления которых могут выходить на передний план (например, при инсулинозависимом сахарном диабете). В основном проявления аутоиммунной патологии определяется локализаций аутоантигена в организме. В зависимости от этого выделяют органоспецифические и системные болезни аутоагрессии.
Органоспецифические АИЗ возникают в том случае, когда вырабатываемые аутоантитела и аутореактивные лимфоциты направлены против аутоантигена, локализующегося в одном органе. И только в нем индуцируются патологические иммунные реакции.
Примеры: аутоиммунный тиреоидит (тиреоидит Хашимото), болезнь Грейвса (диффузный токсический зоб), болезнь Аддисона, инсулинозависимый сахарный диабет 1- го типа, аутоиммунная гемолитическая анемия, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона
Причины развития аутоиммунных заболеваний
В настоящее время не установлено точных и однозначных причин и механизмов развития аутоиммунных заболеваний. К наиболее вероятным механизмам происхождения аутоиммунных заболеваний относят:
1. изменения в системе иммунобиологического надзора (антигеннезависимые);
2. вызванные изменениями вне системы иммунобиологического надзора (антигензависимыми).
Принципы диагностики аутоиммунных заболеваний:
Клиническая диагностика предполагает определение нозологической формы АИЗ и постановку диагноза, опираясь на результаты сбора анамнеза, физикальные обследования, данные инструментальных и лабораторных исследований.
Иммунодиагностика включает определение уровня антител к определенным аутоантигенам, клонотипирование Т лимфоцитов (выявление аутореактивных клонов Т лимфоцитов и их количества), а также определение концентрации провоспалительных медиаторов.
Генотипирование HLA носит, скорее, прогностический характер, и помогает установить группы риска развития АИЗ.

Иммунодефициты (ИД) – это снижение количественных показателей и (или) функциональной активности основных компонентов иммунной системы, которые ведут к нарушению защиты организма от микробов и проявляются повышенной инфекционной заболеваемостью. Традиционно ИД подразделяют на первичные иммунодефициты и вторичные.
Первичные иммунодефициты (ПИД) – врожденные нарушения иммунной системы, которые связанны с генетическими дефектами одного или нескольких компонентов иммунной системы.
Синдром вторичной иммунной недостаточности (ВИН) – это нарушения иммунной системы, которые развиваются в позднем постнатальном периоде или у взрослых и характеризуются хроническими инфекционно-воспалительными заболеваниями, которые торпидны к традиционной стандартной терапии.
Диагностика данных заболеваний разделена на тесты 1-го и 2-го уровней.
К тестам 1-го уровня, относятся методы, которые направленны на идентификацию того продукта функционирования соответствующей системы иммунитета, определяющий ее антимикробный эффект. Тесты 2-го уровня являются дополнительными. То есть они существенно обогащают информацию о функционировании соответствующей системы иммунитета.
К тестам 1-го уровня для оценки фагоцитоза относится определение:
• абсолютного числа нейтрофилов и моноцитов;
• интенсивности поглощения микробов нейтрофилами и моноцитами;
• способности фагоцитов убивать микробы.

К тестам 2-го уровня оценки фагоцитоза можно отнести определение:
• интенсивности хемотаксиса фагоцитов;
• экспрессии молекул адгезии (CD11a, CD11b, CD11c, CD18) на поверхностной мембране нейтрофилов.
К тестам 1-го уровня оценки B-системы иммунитета можно отнести определение:
• иммуноглобулинов G, A, M в сыворотке крови;
• иммуноглобулина E в сыворотке крови;
• определение процента и абсолютного количества B-лимфоцитов (CD19, СD20) в периферической крови.
Определение уровня иммуноглобулинов — это по-прежнему важный и надежный метод оценки B-системы иммунитета. Его можно считать главным методом диагностики всех форм иммунодефицитов, связанных с биосинтезом антител.
К тестам 2-го уровня оценки В-системы иммунитета относится определение:
• субклассов иммуноглобулинов, особенно IgG;
• секреторного IgA;
• соотношения каппа- и лямбда-цепей;
• специфических антител к белковым и полисахаридным антигенам;
• способности лимфоцитов давать пролиферативный ответ на B-(стафилококк, липополисахарид энтеробактерий) и T-B-(митоген лаконоса) митогены.

Определение субклассов IgG представляет определенную диагностическую ценность, так как при нормальном уровне IgG могут быть дефициты по субклассам иммуноглобулинов. У таких людей в ряде случаев наблюдаются иммунодефицитные состояния, которые проявляются в повышенной инфекционной заболеваемости. Так, IgG2 является субклассом иммуноглобулина G, который преимущественно содержит антитела против полисахаридов инкапсулированных бактерий (Haemophiluls influlenzae, Steptococculs pneulmoniae). Поэтому дефицит, связанный с IgG2, а также с IgA, ведет к повышенной заболеваемости респираторными инфекциями. В данном случае нарушения в соотношении субклассов IgA и в соотношении каппа- и лямбда-цепей также могут быть причиной иммунодефицитных состояний. Важную информацию о состоянии гуморального иммунитета дает определение антител к бактериальным белковым и полисахаридным антигенам, так как степень защиты организма от данной конкретной инфекции зависит не от общего уровня иммуноглобулинов, а от количества антител к ее возбудителю. Особенно наглядно демонстрируют это данные, которые свидетельствуют о том, что развитие хронических синуситов и отитов зависит только от дефицита у таких больных IgG3-антител к Moraxella catarrhalis. Другим наглядным примером важности определения специфических антител могут служить данные, которые доказывают, что у лиц, страдающих частыми инфекционными процессами дыхательных путей, при нормальном уровне всех классов иммуноглобулинов существенно понижен титр антител к Haemophiluls influlenzae.
С помощью скрининг-тестов можно выявить следующие виды ПИД:
• Х-сцепленную агаммаглобулинемию
• Общую вариабельную иммунологическую недостаточность (ОВИН)
• Гипер-IgM-синдром
• Селективный дефицит IgA
• Тяжелый комбинированный иммунодефицит
• Синдром Вискотта-Олдрича
• Дефициты в системе комплемента