перевод

Тест на фіксацію комплементу вважається найточнішим із серологічних тестів для залох у всіх видах. Достатньо розвитку антитіла, щоб досягти позитивної реакції протягом приблизно семи днів після інфікування, і така ситуація існує протягом тривалого періоду у хронічно уражених тварин. Кінь вважається зараженим Actinobacillus mallei, коли 0-1 мл або менше його сироватки повністю блокує гемоліз. Аналогічні значення щодо кількості сироватки, необхідні для отримання позитивних та негативних реакцій фіксації комплементу, застосовуються в діагностиці дієтину та деяких інших типів тріпаносомозу.

Тест на фіксацію комплементу має значення для виявлення худоби, зараженої бруцеллою; Він більш ефективний на ранніх стадіях зараження, ніж будь-який тест на аглютинацію. Незважаючи на те, що тест здатний розрізняти післявакцинальні та постінфекційні антитіла, ця диференціація є лише задовільною, коли вакцинація дала випробування на значний період.

Тест на фіксацію комплементу застосовувався досить періодично в діагностиці хвороби Джона в овець і великої рогатої худоби. Віртуальне викорінення туберкульозу великої рогатої худоби в останні роки дало новий імпульс для оцінки ефективності цього тесту. В даний час його найбільша користь полягає в підтвердженні клінічно підозрілих випадків хвороби Джона (точність близько 90%), що дає позитивні реакції, навіть на ранній фазі. Проте в польових умовах між встановленням інфекції та появою антитіл, які можна виявляти, може пройти кілька місяців. Ступінь специфічності тесту у тварин, що не мають клініки, та у тварин з туберкульозом досить низька (25%), і це дає значну частку помилкових результатів у звичайних тварин. Ряд країн у всьому світі допускає ввезення великої рогатої худоби тільки на підставі негативного тесту фіксації комплементу щодо хвороби Джона.

Незважаючи на те, що вірус, відповідальний за ензоотичний аборт у овець, має поширені антигени з іншими вірусами групи пситтакоз-лімфогранулома. Ретроспективна діагностика собачих інфекційних гепатитів або лихорадки в собак може бути встановлена ​​за допомогою тесту фіксації комплементу.

Перевірка на осад

Принцип цього випробування дещо схожий на аналіз тесту на аглютинацію, за винятком того, що реакція відбувається на границі розчинного антитіла у вигляді глобуліну та готового розчинного екстракту антигену. Реакція на випадання осадів може проходити при кімнатній температурі, але в деяких випадках прискорюється впливом температури від 37 ° C до 55 ° C (98-8-131 ° F). Випробування можна проводити як гель-дифузійний тест (імунодифузія), використовуючи невеликі лунки, розрізані на агарному гелі або в невеликих трубках.

Тест на випадок преципітації найбільше застосовують при класифікації стрептококів. Останнім часом широко використовуються тестування дифузії агар-гель, які використовуються при дослідженні та діагностиці багатьох вірусних захворювань, наприклад: Свиняча чума, хвороба слизу, лихоманка в свиней. Цей тип тесту може бути прийнятий для виявлення антигену або антитіла. Позитивний результат приймає форму білої лінії преципітації.

Тести на гемаглютинацію

Ці тести не залежать від утворення комплексу антиген-антитіла. Багато вірусів при змішуванні з промитими курячими еритроцитами викликають їх аглютинацію. Гомологічні вірусні антитіла запобігають появі цього явища. При виконанні тесту стандартна суспензія еритроцитів змішується з вірусом у пробірці, яку потім залишають постояти протягом кількох годин. Якщо червоні клітини залишаються неглюгінованими, вони осідають і збирають масою в нижній частині трубки; Коли агреговані клітини утворюють тонку плівку по всьому дну трубки. Метод тесту може бути прийнятий для виявлення вірусу чи антитіла (тест на інгібування гемаглютінації), останній зазвичай з'являється в крові заражених тварин та птахів протягом декількох днів після розвитку клінічних ознак захворювання і має Досягнути високого титру протягом декількох тижнів. Відомо, що інші фактори, крім вірусного антитіла, інгібують гемаглютінацію; Для міксовирозу ці фактори можна видалити обробкою трипсином і арбовірусами шляхом екстракції ацетоном.

Тест на нейтралізацію вірусів

Цей тип серологічного тесту застосовується тільки у тих випадках, коли готові вірусні антитіла утворюються твариною після інфікування. У цій формі тест має ретроспективне значення в діагностиці, хоча його можна використовувати для ідентифікації вірусу на більш ранній стадії. Оскільки віруси ростуть лише у живих клітинах, використання цього типу тесту залежить від наявності відповідних тканинних клітинних культур, курей-ембріонів або чутливої ​​лабораторної тварини. Ряд вірусів здатний викликати мікроскопічні цитопатогенні ураження в деяких клітинах тканинних культур та / або ембріонів курчат. Додавання гомологічного антитіла до вірусу у відповідній кількості шляхом послідовного розбавлення останнього запобігає множення вірусу, коли його вводять у сприйнятливі клітини. Таким чином, наявність гомологічного вірусного антитіла індицирована, коли цитопатогенні ураження не розвиваються.

Віруси, які можуть бути визнані за допомогою цього тесту, включають в себе ті, що викликають захворювання, що викликають хворобу, вірусний енцефаломієліт свиней, псевдопорожнини (хвороба Ауєскі), кістковий енцефаломієліт, інфекційний ринотрахеїт великої рогатої худоби, свинячий грип, африканська кісткова хвороба тощо.

Тест на нейтралізацію токсинів

Принцип цього випробування - виявлення специфічного токсину в тканинах чи кишковому вмісті тварин за допомогою ін'єкції фільтрату невідомого матеріалу разом з однією з серій очищених антитоксинів у лабораторних тварин відповідного виду. І навпаки, антитоксин можна ідентифікувати в сироватці виведених тварин після первинного титрування з рядом відомих токсинів. Хвороби, які можна розпізнати за допомогою цього методу, включають дизентерію ягняти, пульпу нирки, етнотоксичну епідемію, інфекційний некротичний гепатит, правцю, злоякісний набряк та виразковий лімфангіт.

Імунофлюоресценція

Техніка маркування антитіл або антигенів певними хімічними речовинами, які володіють властивостями флуоресценції, є досить недавнім досягненням. Таку кон'югацію, що відбулась між конкретними міченими глобулінами та антигеном, можна визначити лише за допомогою спеціальних мікроскопів, розроблених для використання з ультрафіолетовим підсвічуванням. Оскільки такі мікроскопи дорогі для придбання, застосування методів імунофлюоресцентних тестів у діагностиці не є загальновикористанними. Проте, корисно мати певні знання про можливості іммунофлюоресценції в діагностиці, а також про тип і характер матеріалів, які можуть бути подані до лабораторій, підготовлених для проведення експертизи.

У процесі маркування звичайно використовується флуоресцеїн (це дає видиме світло яблучно-зеленого кольору). Основним принципом, що бере участь у процедурі, є те, що мікрокон'югація відбувається на слайді мікроскопа між відомими міченим антитілом та специфічним збудником, коли останній присутній навіть у дуже малих числах, або живий, або мертвий. І навпаки, використовуючи відомий мічений антиген, можна узнати, чи невідома сироватка містить будь-яке специфічне антитіло. На додаток до прямих методів, як описано, можна застосовувати бутерброд або непрямий спосіб, в якому використовується маркований антиглобулін. Цей останній метод є більш універсальним, ніж прямий метод.

Програми. За допомогою готових мазків прямий метод може бути використаний для ідентифікації конкретних патогенів при очікуванні результатів традиційних бактеріологічних методів. За допомогою спеціальних мічених сироваток можна ідентифікувати різні види клостридіальних організмів, з яких можна швидко діагностувати такі захворювання, як дизентерія ягняти, пульпонозний захворювання нирок, ентеротокемія, інфекційний некротичний гепатит, правця, чорнило тощо. Інші умови, які можуть бути діагностовані таким чином, - лістеріоз та сказ.

Непряма або сендвіч-технологія може використовуватися при діагностиці тих же умов, що і прямі випробування. Через його більший діапазон застосування він особливо корисний у виявленні наявності інфекційного вірусу гепатиту собак та Toxoplasma gondii в мазках з відбитками, виготовленими з відповідного матеріалу. Тільки непрямий тест здатний виявляти антитіло замість антигену. За допомогою цього методу можна продемонструвати наявність в сироватці антитіл до Babesia bigemina.